基于轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA3的IRPS雙向免疫調(diào)節(jié)機(jī)理的研究.pdf

1、為了闡明板藍(lán)根多糖雙向免疫調(diào)節(jié)的內(nèi)在機(jī)理，確定雙向免疫調(diào)節(jié)的關(guān)鍵因子，為中藥的雙向免疫調(diào)節(jié)作用提供理論支持，本試驗(yàn)用不同劑量的環(huán)磷酰胺以不同的注射方式建立免疫抑制和免疫亢進(jìn)大鼠模型，并以該大鼠模型為媒介在不同的時(shí)間點(diǎn)從轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子以及機(jī)體免疫三方面來(lái)研究板藍(lán)根多糖對(duì)不同免疫狀態(tài)大鼠的影響，試驗(yàn)分5部分，如下所述:
　　試驗(yàn)一不同劑量的IRPS灌胃大鼠，通過(guò)檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖活性，NK細(xì)胞活性以及血清中抗體含量確定了IRPS作用

2、于大鼠最佳劑量為60mg/kg，為后續(xù)進(jìn)一步的試驗(yàn)研究做了準(zhǔn)備。
　　試驗(yàn)二為了建立免疫抑制以及免疫亢進(jìn)動(dòng)物模型，本試驗(yàn)用不同劑量的Cy在不同的時(shí)間以不同的方式作用于大鼠，并從免疫器官、免疫細(xì)胞、抗體和細(xì)胞因子等方面對(duì)所造模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在腹腔注射OVA后6h腹腔一次性注射Cy125mg/kg或100mg/kg能構(gòu)建良好的免疫抑制模型，在免疫OVA前3d腹腔一次性注射Cy20mg/kg，能夠構(gòu)建良好的免疫亢進(jìn)模型。
　

3、　試驗(yàn)三劑量為60mg/kg的IRPS灌胃不同免疫狀態(tài)的大鼠，并在免疫的第6d和第12d，檢測(cè)大鼠T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖情況，NK細(xì)胞的活性以及抗體分泌量，結(jié)果表明在免疫第6d，IRPS對(duì)不同免疫狀態(tài)大鼠B淋巴細(xì)胞有雙向免疫調(diào)節(jié)作用，對(duì)免疫狀態(tài)正常大鼠和免疫抑制大鼠T淋巴細(xì)胞增殖活性影響不顯著;在免疫第12d，IRPS主要發(fā)揮免疫增強(qiáng)作用，能夠增強(qiáng)免疫正常狀態(tài)大鼠和免疫亢進(jìn)大鼠機(jī)體的免疫功能，對(duì)于免疫抑制大鼠發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)作用的同時(shí)

4、也有一定的免疫增強(qiáng)作用。
　　試驗(yàn)四劑量為60mg/kg的IRPS灌胃不同免疫狀態(tài)的大鼠，在不同的時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)不同免疫狀態(tài)大鼠Th1/Th2型細(xì)胞因子以及炎性因子的含量，結(jié)果表明IRPS能夠緩解免疫亢進(jìn)組大鼠Th1/Th2型細(xì)胞因子的降低趨勢(shì)，對(duì)免疫抑制組大鼠Th1/Th2型細(xì)胞因子的升高趨勢(shì)也有一定的抑制作用，對(duì)不同免疫狀態(tài)大鼠炎性因子的分泌有雙向調(diào)節(jié)作用，說(shuō)明IRPS能夠依據(jù)機(jī)體所處免疫狀態(tài)的不同對(duì)細(xì)胞因子表達(dá)發(fā)揮不同的調(diào)節(jié)作用

5、。
　　試驗(yàn)五劑量為60mg/kg的IRPS灌胃不同免疫狀態(tài)的大鼠，在不同的時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)不同免疫狀態(tài)大鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA3mRNA的表達(dá)，結(jié)果表明IRPS對(duì)免疫抑制大鼠T-bet/GATA3的比值有一個(gè)明顯的雙向調(diào)節(jié)作用，同時(shí)也能夠降低免疫狀態(tài)正常大鼠T-bet/GATA3的比值。
　　上述試驗(yàn)結(jié)果表明:IRPS能夠通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子分泌和轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響進(jìn)而對(duì)免疫亢進(jìn)和免疫抑制大鼠發(fā)揮雙向免疫調(diào)節(jié)作用，對(duì)健康大鼠發(fā)