邵氏“五針法”對(duì)哮喘模型大鼠T-bet、GATA-3蛋白表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　通過針刺哮喘模型大鼠“肺俞”、“大椎”、“風(fēng)門”穴，觀察針刺對(duì)哮喘模型大鼠肺組織和血清中轉(zhuǎn)錄因子 T-bet、GATA-3蛋白的表達(dá)及肺組織 HE染色病理變化的影響，探討針灸治療哮喘的機(jī)理，為針灸治療哮喘機(jī)制提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　方法：
　　選用健康雄性清潔級(jí)SD大鼠40只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、藥物治療組、針刺治療組，每組10只。采用腹腔注射卵蛋白（OVA）和氫氧化鋁干粉配置成的10％的復(fù)合

2、 OVA抗原液致敏，并用1%的OVA溶液霧化吸入激發(fā)建立大鼠哮喘模型。針刺治療組采用針刺“肺俞”(雙)、“大椎”、“風(fēng)門”(雙)治療，藥物治療組采用腹腔注射地塞米松治療，模型對(duì)照組不做特殊處理，空白對(duì)照組用生理鹽水代替卵蛋白，不予造模。治療結(jié)束后，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中轉(zhuǎn)錄因子 T-bet、GATA-3蛋白表達(dá)，免疫組化法測(cè)定肺組織中轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3蛋白表達(dá)，HE染色法觀察肺組織病理改變情況。
　　結(jié)果：

3、r>　　1.各組大鼠行為體征觀察
　　模型對(duì)照組大鼠與空白對(duì)照組比較，出現(xiàn)噴嚏、嗆咳、呼吸急促、精神不振、反應(yīng)遲鈍；而空白對(duì)照組大鼠未見異常；針刺治療組、藥物治療組哮喘模型大鼠噴嚏、嗆咳、喘息等癥狀較模型對(duì)照組明顯減輕，反應(yīng)靈敏。
　　2.各組大鼠肺組織形態(tài)學(xué)比較
　　模型對(duì)照組大鼠肺組織氣道上皮脫落、黏膜增厚、大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡間隔增寬，肺泡壁破裂甚至融合擴(kuò)大；藥物治療組、針刺治療組支氣管結(jié)構(gòu)基本完整，肺組織炎癥

4、浸潤(rùn)細(xì)胞較少，肺泡結(jié)構(gòu)基本正常；空白對(duì)照組大鼠支氣管肺組織結(jié)構(gòu)完整，無(wú)明顯脫落和皺褶，未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡、肺泡間隔形態(tài)結(jié)構(gòu)正常。
　　3.各組大鼠肺組織中T-bet蛋白表達(dá)的比較
　　模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺組織中轉(zhuǎn)錄因子T-bet陽(yáng)性表達(dá)明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；藥物治療組、針刺治療組與模型對(duì)照組比較，T-bet陽(yáng)性表達(dá)升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），仍低于空白對(duì)照組；

5、針刺治療組與藥物治療組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　4.各組大鼠肺組織中GATA-3蛋白表達(dá)的比較
　　模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠肺組織中轉(zhuǎn)錄因子GATA-3陽(yáng)性表達(dá)明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；藥物治療組、針刺治療組與模型對(duì)照組比較，GATA-3陽(yáng)性表達(dá)降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），仍高于空白對(duì)照組；針刺治療組與藥物治療組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)

6、。
　　5.各組大鼠血清中T-bet蛋白表達(dá)的比較
　　模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較，大鼠血清中T-bet蛋白表達(dá)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；針刺治療組及藥物治療組與模型對(duì)照組比較，T-bet蛋白表達(dá)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，但仍低于空白對(duì)照組；針刺治療組與藥物治療組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　6.各組大鼠血清中T-bet蛋白表達(dá)的比較
　　模型對(duì)照組與空白

7、對(duì)照組比較，大鼠血清中GATA-3蛋白表達(dá)顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；針刺治療組及藥物治療組與模型對(duì)照組比較，GATA-3蛋白表達(dá)明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，但仍高于空白對(duì)照組；針刺治療組與藥物治療組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.邵氏“五針法”能明顯改善哮喘模型大鼠的癥狀體征。
　　2.邵氏“五針法”可使哮喘模型大鼠肺組織局部的炎性細(xì)胞減少，抑制炎性

8、介質(zhì)的釋放，修復(fù)損傷的支氣管黏膜上皮，從而改善氣道炎癥，這可能是邵氏“五針法”防治哮喘的作用機(jī)制之一。
　　3.邵氏“五針法”能使哮喘模型大鼠肺組織中T-bet蛋白表達(dá)明顯升高，G ATA-3蛋白表達(dá)明顯降低。
　　4.邵氏“五針法”能使哮喘模型大鼠血清中T-bet蛋白表達(dá)明顯升高，GATA-3蛋白表達(dá)明顯降低。
　　本研究表明邵氏“五針法”可能通過提高肺組織及血清中T-bet含量，降低肺組織及血清中G ATA-3蛋白