山茱萸炮制過程監(jiān)測及質量控制研究.pdf

1、中藥山茱萸為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinals Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉。山茱萸是珍貴的中國草藥，也是現(xiàn)代化醫(yī)療、保健食品等領域的研究熱點。臨床上經(jīng)常以酒山茱萸入藥，它具有滋陰補腎的功效。研究顯示山茱萸炮制后藥效成分（氨基酸、環(huán)烯醚萜等）含量降低，有機酸、5-羥甲基糠醛等成分含量增高。本課題采用傳統(tǒng)鑒定方法及先進的現(xiàn)代分析技術兩種檢測方式，研究山茱萸炮制過程中化學成分含量的變化，以闡明山茱萸炮制的機理，

2、并為提高山茱萸飲片炮制規(guī)范提供依據(jù)。
　　1.山茱萸炮制品質量標準的傳統(tǒng)檢驗方法
　　山茱萸炮制品傳統(tǒng)的鑒定方法，包括鑒定其性狀，對水分、灰分、浸出物含量進行測定，采用薄層色譜方法定性鑒別酒萸肉中的熊果酸和馬錢苷，液相色譜法檢測其中馬錢苷、莫諾苷的含量。選擇三批酒蒸山茱萸樣品對其進行質量評定，結果顯示其性狀合格，三批飲片均含有熊果酸和馬錢苷，水分、灰分和浸出物含量合格，馬錢苷、莫諾苷含量合格，說明三批酒萸肉樣品符合藥典標準。

3、為了進一步驗證炮制后山茱萸的品質，實驗中還測定了各批次酒山茱萸中沒食子酸、多糖、總黃酮、總有機酸、總皂苷的含量，結果表明三批次酒萸肉品質較好，質量均一穩(wěn)定。
　　2.山茱萸炮制過程中的紅外光譜分析
　　利用紅外光譜技術，分析炮制過程中山茱萸紅外光譜的宏觀和指紋特征。以酒蒸法炮制山茱萸藥材，對炮制過程中不同時間的酒萸肉進行紅外光譜信息采集并進行分析。根據(jù)紅外光譜信息，在3309 cm-1，1713 cm-1，1028 cm-1

4、處有特征吸收，可以推斷山茱萸中存在醇類、有機酸類、酯類等化合物。通過實驗分析，發(fā)現(xiàn)氨基化合物在0～24 h內(nèi)的含量變化呈現(xiàn)出下降的趨勢，而在24～48 h之間含量下降趨勢變緩，結合實驗前期對山茱萸炮制過程中理化參數(shù)研究結果，判斷18～24 h為最適宜炮制時間。紅外光譜分析快速、方便，特征性強，可以識別山茱萸炮制品中的主體成分，為炮制工藝的優(yōu)化提供科學的依據(jù)。
　　3.GC-MS檢測山茱萸炮制過程中揮發(fā)性成分含量變化
　　探討

5、氣相色譜-質譜(GC-MS)聯(lián)用對山茱萸炮制過程中化學成分含量變化的研究。先用酒蒸法炮制山茱萸，再用甲酯化的方法制備樣品溶液，對炮制過程中0～48 h的酒萸肉進行氣質聯(lián)用信息的采集并進行化學成分的含量檢測。采用氣相色譜-質譜技術進行分析，從不同炮制時間的山茱萸樣品中共分離出60多個組分，計算了各色譜峰的相對含量，并從中鑒定了35種成分。主要成分為對羥基苯甲酸甲酯、檸檬酸三甲酯、1-羥基均丙三羧酸三甲酯、壬二酸二甲酯、肉豆蔻酸甲酯、3-(

6、4-羥苯基)-2-丙烯酸甲酯、4-甲基-1，6-庚二烯-4-醇、9-十六碳烯酸甲基酯、棕櫚酸甲酯、鄰苯二甲酸二丁酯等。氣質聯(lián)用法應用快速、方便，特征性強，可以識別炮制前后山茱萸中的主要成分，闡明山茱萸的炮制機理，為炮制工藝的優(yōu)化提供科學的依據(jù)。
　　4.山茱萸炮制過程中HPLC和UFLC-TOF-MS動態(tài)分析
　　建立HPLC和UFLC-TOF-MS方法，研究比較山茱萸炮制過程中化學成分的動態(tài)過程。HPLC采用Kromasi

7、l C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5μm)，乙腈-水(7∶93)等度洗脫測定5-羥甲基糠醛，乙腈-水(15∶85)等度洗脫測定馬錢苷;UFLC-TOF-MS:乙腈-0.01％醋酸水溶液梯度洗脫分析山茱萸提取物;Shimadzu UFLC液相系統(tǒng)，AB SCIEX Triple TOFTM5600質譜儀;負離子檢測模式。通過高效液相色譜和液相質譜聯(lián)用技術，發(fā)現(xiàn)不同炮制時間下山茱萸中5-羥甲基糠醛、馬錢苷、槲皮素等物質含量均有顯