瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病的相關性研究.pdf

1、本文分為兩個部分進行探討：
　　第一部分 瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病的Meta分析
　　目的：采用Meta分析的方法綜合系統(tǒng)地評價瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病的相關關系。
　　方法：通過檢索CNKI、CBM、Pubmed、萬方等數(shù)據(jù)庫收集相關文獻，采用stata.11軟件進行Meta分析。
　　結果：最終納入10篇病例對照文獻，6324例研究對象，其中2型糖尿病患

2、者3633例，對照組2691例。Meta分析結果顯示，病例組和對照組基因頻率分布差異具有統(tǒng)計學意義，攜帶A等位基因者可能增加T2DM的患病風險[A vs G：OR(95％CI)=1.599(1.337，1.913)]，病例組和對照組基因型分布差異無統(tǒng)計學意義[AA vs GG：OR(95%CI)=1.069(0.787，1.453)：(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.040(0.905，1.194)：AA vs(GG+A

3、G)：OR(95%CI)=0.995(0.798，1.239)]。按種族進行亞組分析，在等位基因模式下，黃種人群攜帶A等位基因者是攜帶G等位基因者的1.808倍（OR(95%CI)=1.808(1.571，2.081)），白種人群攜帶A等位基因者是攜帶G等位基因者的1.261倍（OR(95%CI)=1.261(1.052，1.511)，病例組和對照組基因型分布差異均無統(tǒng)計學意義[黃種人AA vs GG：OR(95%CI)=1.020(0

4、.620，1.679)：AA vs(AG+GG)：OR(95%CI)=1.032(0.892，1.194);(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.019(0.875，1.187);白種人：AA vs GG：OR(95%CI)=1.101(0.746，1.623)：AA vs(AG+GG)：OR(95%CI)=0.990(0.775，1.265);(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.144(0.818，1.600

5、)]。
　　結論：LEPRrs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病存在關聯(lián)，等位基因A可能會增加2型糖尿病的患病風險。
　　第二部分 瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病關系的病例對照研究
　　目的：探討瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與2型糖尿病易感性的關系。
　　方法：1.隨機選取2010年5月至2011年12月在內蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、內蒙古中蒙醫(yī)醫(yī)院內分泌科確診的2型糖尿病住院患9

6、4例，收集同期于內蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院參加體檢的年齡相匹配的健康人員105例作為對照，研究對象均簽署知情同意書；
　　2.收集病歷資料，一般資料包括姓名、性別、民族、年齡、身高、體重、家族遺傳史、高血壓史等。研究對象的臨床生化指標如收縮壓、舒張壓、空腹血糖、空腹胰島素、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯，空腹C肽等在內蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科測定；
　　3.瘦素受體基因位點多態(tài)性的檢測①基因組DNA的提?。呵宄靠崭褂肊D

7、TA抗凝管抽取外周靜脈血2ml，采用AXYGEN全血DNA快速提取試劑盒（200次量）提取全血基因組DNA，電泳鑒定基因組DNA純度；②采用聚合酶鏈式反應‐限制性片段長度多態(tài)性（PCR‐RFLP）方法檢測瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性：PCR擴增相應的目的基因，PCR反應總體系25μl。按照如下反應條件在PCR熱循環(huán)儀上擴增：95℃預變性2分鐘，95℃變性45秒，56℃退火30秒，72℃延伸45秒，共進行30個循環(huán)，最后72℃

8、延伸10分鐘；④使用1%瓊脂糖進行電泳，穩(wěn)壓80伏電泳20分鐘，在紫外燈下通過觀察DNA分子發(fā)出的熒光而判斷其片段大小，rs1137101基因純合子GG型產生291bp和127bp兩個條帶，純合子AA型產生421bp一條條帶，而雜合子AG產生421bp291bp127bp三條條帶。
　　4.統(tǒng)計學處理：采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，計量資料用“均數(shù)±標準差”表示，計數(shù)資料用例數(shù)（百分比）表示。分析病例組與對照組之間

9、基本臨床資料的差異，兩組計量資料比較如服從正態(tài)分布采用獨立t檢驗，非正態(tài)分布采用秩和檢驗。采用x2檢驗比較兩組間定性資料，采用x2檢驗分析各組基因型分布是否符合Hardy‐Weinberg(H‐W)遺傳平衡，采用4種遺傳分析模型分析LEPRrs1137101等位基因及基因型頻率在兩組間的分布。應用多因素非條件Logistic回歸計算比值比（Odds Ratio,OR）及其95%可信區(qū)間（Confidence Interval,CI）評估

10、年齡、家族遺傳史、高血壓史等與2型糖尿病患病風險的關系。
　　結果：1.T2DM患者年齡為（54.71±1.71）歲，正常對照組年齡為（53.50±7.37）歲，兩組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;2型糖尿病患者中男性59例（62.77%），女性
　　35例（37.23%），正常對照組中男性75例（71.43%），女性30例（28.57%），兩組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；LEPRrs1137101基因型分布頻率

11、符合Hardy‐Weinberg(H‐W)遺傳平衡（病例組：x2=2.363，P＞0.05；對照組：x2=1.588，P＞0.05）；
　　2.logistic回歸顯示，高血壓史、高舒張壓、家族遺傳史、肥胖、甘油三酯、異常空腹C肽是2型糖尿病的危險因素（OR值分別為1.969,2.012,2.676,2.264,2.257,3.673）；
　　3.通過比較在4種模型下基因型在兩組間的分布差異，結果均顯示不存在統(tǒng)計學差異[(A

12、A+AG)vs GG：x2=0.499，P=0.480；AA vs(AG+GG)：x2=0.000,P=1；(AA+GG)vs AG：x2=0.483，P=0.487；A vs G：x2=0.408，P=0.523]。
　　結論：1.遺傳史、高血壓、肥胖是2型糖尿病的危險因素，空腹C肽不僅是胰島β細胞的檢測指標，其在2型糖尿病發(fā)病過程中可能起保護作用。
　　2.未發(fā)現(xiàn)瘦素受體基因rs1137101位點多態(tài)性與T2DM存在關聯(lián)