枸杞子抗阿爾茨海默病活性成分研究.pdf

1、寧夏枸杞是茄科枸杞屬灌木，自然生長(zhǎng)于亞洲地區(qū)，主要分布在中國(guó)西北部。枸杞子是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材，始載于神農(nóng)本草經(jīng)，被列為上品?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2015版規(guī)定，枸杞子（wolfberry。goji berry）為茄科植物寧夏枸杞（Lycium barbarum）的干燥成熟果實(shí)，具有滋肝補(bǔ)腎、益精明目的功效。目前，枸杞子作為中藥及功能食品在全世界范圍廣泛使用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，枸杞子具有抗氧化、抗衰老、神經(jīng)保護(hù)、抗阿爾茨海默病（Al

2、zheimer’s disease。AD）和保肝等藥理活性。大量文獻(xiàn)研究表明了枸杞多糖、多酚及類胡蘿卜素類是枸杞子中的主含活性成分。
　　本論文運(yùn)用大孔樹(shù)脂柱色譜、硅膠柱色譜、ODS柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜以及反相高效液相色譜法等現(xiàn)代色譜學(xué)分離手段，對(duì)枸杞子60％乙醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分離，從中共分離得到了83個(gè)化合物。通過(guò)理化性質(zhì)、現(xiàn)代波譜學(xué)手段（UV、IR、MS、NMR）和化學(xué)方法，鑒定了這些化合物的

3、結(jié)構(gòu)，包括15個(gè)二咖啡酰亞精胺類衍生物（1?15），15個(gè)苯丙酰苯乙胺衍生物（16?30），28個(gè)苯丙素類化合物（31?58），4個(gè)香豆素類化合物（59?62），8個(gè)木脂素類化合物（63?70），5個(gè)黃酮類化合物（71?75），3個(gè)異黃酮類化合物（76?78），2個(gè)綠原酸類衍生物（79和80）和3個(gè)苯甲酸類衍生物（81?83）。其中，27個(gè)為新化合物，即 lycibarbarspermidines A?O（1?15）、N-(4-O-β-

4、D-glucopyranosyl-cis-feruloyl)-tyramine（16）、(7''S*,8''R*)-canabisine H（25）、lycibarbarphenylpropanoids A?I（31?39）和lycibarbarcoumarin A（59）。29個(gè)已知化合物（17?19、24、27、29、30、40?49、54、56?58、64?66、69、70和76?78）首次從枸杞屬植物中分離獲到。本研究首次從枸杞

5、子中分離得到了二咖啡酰亞精胺類衍生物、木脂素和異黃酮類成分。二咖啡酰亞精胺類衍生物是一類稀有的植物次級(jí)代謝產(chǎn)物，主要分布在茄科植物中。目前，這類化合物僅鑒定了6個(gè)，均為直鏈的非糖苷化產(chǎn)物。本研究所報(bào)道的化合物1?15是首例二咖啡酰亞精胺類衍生物糖苷化產(chǎn)物，其中化合物14?15是首次報(bào)道的二咖啡酰亞精胺類衍生物環(huán)化產(chǎn)物。通過(guò)分析化合物分離純化流程可知，二咖啡酰亞精胺類衍生物是枸杞子中一類主含特征性成分。
　　本課題組前期采用轉(zhuǎn)基因A

6、D果蠅模型，篩選出枸杞子提取物能顯著性改善果蠅短時(shí)學(xué)習(xí)記憶能力。本研究也采用該模型，對(duì)枸杞子提取物大孔樹(shù)脂各洗脫餾分進(jìn)行抗AD活性評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)主要餾分 LBB（大孔樹(shù)脂30%乙醇-水洗脫餾分）能顯著性改善果蠅短時(shí)學(xué)習(xí)記憶能力。我們對(duì)餾分 LBB進(jìn)行分離，首次發(fā)現(xiàn)了枸杞子中一類主含特征性成分，二咖啡酰亞精胺類衍生物。同時(shí)，我們借助轉(zhuǎn)基因AD果蠅模型，對(duì)主含特征性成分二咖啡酰亞精胺類衍生物進(jìn)行抗AD活性評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所有二咖啡酰亞精胺類

7、衍生物均不同程度地改善果蠅短時(shí)學(xué)習(xí)記憶能力。因此，二咖啡酰亞精胺類衍生物是枸杞子中一類主含特征性的抗AD活性成分。
　　本研究也采用分子水平篩選模型，如ThT模型、Ellman模型、DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)和oxygen radical absorbance capacity(ORAC)實(shí)驗(yàn)，對(duì)枸杞子中所有單體化合物進(jìn)行體外抗 AD及抗氧化活性評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所有化合物均顯示了不同程度的oxygen radical absorb