HIV對CD4+T細(xì)胞亞群的損傷及表位疫苗的免疫原性測定.pdf

1、背景與目的：
　　至今為止，以預(yù)防人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）感染為目的的疫苗研究尚未取得重大突破。高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（Highly Active AntiRetroviral Therapy, HAART）或稱聯(lián)合抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（combined AntiRetroviral Therapy,cART）極大地改變了HIV/AIDS的預(yù)后，降低了艾滋病的發(fā)病率和死亡率，而治

2、療就是預(yù)防（treatment as prevention）策略的提出，也在一定程度上減少了HIV的傳播。隨著HAART的普及推廣，很多感染者可以和正常人一樣無病生存，但終生服藥帶來的對社會和個人的巨大壓力是難以承受的，因此追求停藥和治愈始終是未來HIV研究領(lǐng)域最核心的問題。在過去的15年間治療性疫苗的研究方向從最初的作為抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療的替代補(bǔ)充轉(zhuǎn)移到作為清除病毒存儲庫的輔助策略之一。本研究通過生物信息學(xué)方法構(gòu)建了20條CD4+T細(xì)胞

3、表位肽段，涵蓋了HIV的Gag、Env、Pol、Nef區(qū)段，利用IFN-γELISPOT和流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞內(nèi)因子染色對這20條表位肽段的免疫原性進(jìn)行測定和評價。
　　方法：
　　入組未接受過抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療的HIV-1感染者，獲取CD4+T細(xì)胞絕對計數(shù)、血漿HIV RNA等基線臨床資料，采集外周靜脈血并分離PBMC和CD4+ T細(xì)胞。對入組的患者定期隨訪觀察，采集外周血標(biāo)本，對CD4+T細(xì)胞各亞群進(jìn)行染色，分析HIV感染后對C

4、D4+T細(xì)胞各亞群的損傷及抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療后對亞群的恢復(fù)。利用CD4+T細(xì)胞對20條表位肽段進(jìn)行IFN-γELISPOT逐一篩選，將篩選出的免疫優(yōu)勢表位肽段組成肽庫體外刺激PBMC，利用流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞內(nèi)因子染色分析不同CD4+T細(xì)胞亞群產(chǎn)生IL-2、IFN-γ、IL-13、IL-21、TNF-α細(xì)胞因子的能力。
　　結(jié)果：
　　共入組100名HIV感染者，其中男性81名、女性19名，基線CD4+T細(xì)胞絕對計數(shù)為450±169

5、 cells/μL，平均血漿HIV RNA為5.15ⅹ104 copies/mL。啟動抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療的患者CD4+T細(xì)胞絕對計數(shù)月平均增加18 cells/μL；未治療的患者CD4+T細(xì)胞計數(shù)月平均下降8 cells/μL。20條表位肽段具有較好的免疫原性，74.5％的受試者對其中至少一條有反應(yīng)，IFN-γELISPOT篩選出了8條免疫優(yōu)勢表位肽段，主要是針對Gag區(qū)。流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞內(nèi)因子染色發(fā)現(xiàn)表位肽段特異性CD4+T細(xì)胞應(yīng)答主要體