孕期、哺乳期補(bǔ)充適量1,25-(OH)2D3對(duì)哮喘大鼠模型氣道重塑及肺組織中HMGB1、IL-1β的影響.pdf

1、研究目的：
　　1.觀察哮喘大鼠不同時(shí)期肺組織HMGB1、IL-1β的表達(dá)及氣道重塑指標(biāo)（Wat/Pbm、Wam/Pbm）的改變，以及BALF中Eos百分比的變化，探討HMGB1、IL-1β在哮喘大鼠發(fā)病機(jī)制中的作用及兩者的相關(guān)性。
　　2.觀察孕期及哺乳期給予適量1,25(OH)2D3干預(yù)對(duì)哮喘大鼠的子代的氣道重塑影響，以及不同時(shí)期肺組織HMGB1、IL-1β的差別與子鼠氣道重塑的關(guān)系，探討生命初期補(bǔ)充適量1,25(OH)

2、2D3對(duì)子代哮喘的防治及可能機(jī)制。
　　研究方法：
　　雌雄SD大鼠根據(jù)2：1比例合籠，第2天晨初7點(diǎn)查找陰栓，陰栓的發(fā)現(xiàn)標(biāo)記受孕第1天，成功制備孕鼠；將12只孕母鼠完全隨機(jī)均分：a組、b組、c組3組，c組孕母鼠自受孕第7天起，予10μg/kg的1,25(OH)2D3灌胃，隔日1次維持至子鼠生后第21天終止哺乳及干預(yù)；a組及b組孕母鼠以生理鹽水替代；各組子鼠離乳后選取24只設(shè)為相應(yīng)的A組(對(duì)照組)、B組(哮喘組)、C組(Vi

3、tD組)，哮喘組與VitD組以O(shè)VA誘導(dǎo)制得哮喘模型，對(duì)照組生理鹽水替代。于霧化激發(fā)第2周、4周、6周各組均取8只子鼠進(jìn)行取材，用HE染色肺組織，觀察氣道炎癥和肺組織病理變化，并用相關(guān)軟件測(cè)量氣道重塑指標(biāo)（Wat/Pbm、Wam/Pbm）；免疫組化檢測(cè)肺組織中HMGB1、IL-1β的表達(dá)；收集BALF測(cè)定其Eos百分比。
　　研究結(jié)果：
　　1.肺組織病理形態(tài)學(xué)改變:與對(duì)照組比，VitD組可見部分炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管壁及平滑

4、肌輕度增生，管腔輕度狹窄，而哮喘組明顯加重。
　　2.肺組織HMGB1、IL-1β的表達(dá)：哮喘組及VitD組HMGB1、IL-1β自2周起升高，時(shí)間延長(zhǎng)，升高明顯，6周＞4周＞2周，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，各時(shí)間點(diǎn)哮喘組HMGB1、IL-1β的表達(dá)均高于對(duì)照組(P＜0.01)，而VitD組HMGB1、IL-1β蛋白的表達(dá)均低于哮喘組(P＜0.01)，但仍均高于對(duì)照組(P＜0.01)。
　　3.BALF中Eos

5、百分比改變：哮喘組及VitD組Eos百分比漸升高，6周＞4周＞2周，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，各時(shí)間點(diǎn)哮喘組Eos百分比的表達(dá)均高于對(duì)照組(P＜0.01)，而VitD組Eos百分比均低于哮喘組(P＜0.01)，但仍高于對(duì)照組(P＜0.01)。
　　4.Wat/Pbm、Wam/Pbm的比較:哮喘組各時(shí)間點(diǎn)Wat/Pbm、Wam/Pbm均顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)；且隨著激發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)，增生程度逐漸明顯，6周＞4周＞

6、2周，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，VitD組Wat/Pbm、Wam/Pbm均低于哮喘組(P＜0.01)，但仍高于對(duì)照組(P＜0.01)。
　　5.哮喘組相關(guān)性分析：肺組織HMGB1與IL-1β呈正相關(guān)，第2、4、6周(r=0.723，0.769，0.746，P＜0.05)；HMGB1與BALF中Eos百分比顯著正相關(guān)，第2、4、6周(r=0.841，0.857，0.845，P＜0.05)；HMGB1與Wat/Pbm呈正

7、相關(guān)，第2、4、6周(r=0.789，0.818，0.809，P＜0.05)；HMGB1與Wam/Pbm呈正相關(guān)，第2、4、6周(r=0.781，0.792，0.773，P＜0.05)。
　　研究結(jié)論：
　　1.哮喘大鼠存在氣道重塑，時(shí)間越長(zhǎng)，氣道重塑越明顯。
　　2.哮喘組肺組織中HMGB1、IL-1β及BALF中Eos百分比明顯升高，時(shí)間越長(zhǎng)，升高越明顯，提示HMGB1、IL-1β及Eos均參與了哮喘的發(fā)生發(fā)展。<