細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)WHBE兔發(fā)熱模型的建立及其易感性評(píng)價(jià).pdf

1、目的:白毛黑眼兔(White hair black eyes rabbit，WHBE)是浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心于1998年9月在日本大耳白兔(Japanese big-ear white rabbit，JW)生產(chǎn)群中發(fā)現(xiàn)，并通過(guò)定向培育繁殖，逐漸形成的一個(gè)遺傳穩(wěn)定、形態(tài)特征鮮明、生產(chǎn)性能穩(wěn)定的新品系，已在生物醫(yī)學(xué)研究中具有特殊的應(yīng)用價(jià)值。由于兔的體溫變化十分靈敏，最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定，故實(shí)驗(yàn)兔不僅是各種藥品、醫(yī)

2、療器械和生物材料致熱原檢查中常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，也是各種感染性發(fā)熱模型首選的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。因此，建立和研究WHBE兔的發(fā)熱模型及其對(duì)發(fā)熱反應(yīng)易感性，對(duì)拓寬WHBE兔在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用價(jià)值具有重要意義。
　　方法:取健康普通級(jí)WHBE兔98只和JW兔98只，雌雄各半，分別靜脈注射不同劑量(1.25、2.5、5、10 EU/kg)細(xì)菌內(nèi)毒素誘發(fā)WHBE兔和JW兔發(fā)熱反應(yīng)，并設(shè)空白對(duì)照組，記錄升溫曲線圖，計(jì)算發(fā)熱峰值、180min時(shí)體溫差、發(fā)熱

3、指數(shù)以及升溫率，并通過(guò)曲線擬合計(jì)算出體溫升高0.6℃時(shí)的發(fā)熱閾值，探討不同劑量的細(xì)菌內(nèi)毒素對(duì)WHBE兔致熱反應(yīng)的敏感性。在此基礎(chǔ)上，另取雄性WHBE兔和JW兔各24只，采用靜脈注射10EU/kg細(xì)菌內(nèi)毒素誘發(fā)WHBE兔和JW兔發(fā)熱模型，并用20mg/kg布洛芬干預(yù)，記錄升溫曲線圖，計(jì)算發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)、藥物干預(yù)降溫率以及升溫率;同時(shí)造模4h后取血，進(jìn)行血液學(xué)分析和NO含量的測(cè)定，同時(shí)取肝、肺、腎和心臟組織進(jìn)行病理組織學(xué)HE染色觀察，探

4、討WHBE兔對(duì)藥物反應(yīng)的敏感性。
　　結(jié)果:(1)隨細(xì)菌內(nèi)毒素注射劑量的增加致WHBE兔和JW兔的發(fā)熱反應(yīng)增強(qiáng)，性別因素對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素所致WHBE兔和JW兔發(fā)熱反應(yīng)無(wú)明顯影響(P＞0.05)。5 EU/kg和10 EU/kg的細(xì)菌內(nèi)毒素所致WHBE兔的致熱反應(yīng)均高于JW兔，且WHBE兔的升溫率分別為60.7％和92.9％，JW兔的升溫率分別為39.3％和82.1％。另外，WHBE兔和JW兔的發(fā)熱閾值分別為5.72 EU/kg和7.9

5、3 EU/kg。(2)10 EU/kg的細(xì)菌內(nèi)毒素可引起WHBE兔和JW兔明顯的發(fā)熱反應(yīng)，其發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)和升溫率均明顯升高，并可引起白細(xì)胞數(shù)目、中性粒細(xì)胞比例、單核細(xì)胞細(xì)胞比例、血小板數(shù)目和NO含量的顯著升高，而20mg/kg布洛芬干預(yù)后能明顯降低體溫和上述參數(shù)。與JW兔比，WHBE兔對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素所致升溫反應(yīng)更明顯，其發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)、升溫率、中性粒細(xì)胞比例和血小板數(shù)目、NO水平均高于JW兔，且布洛芬干預(yù)后WHBE兔組的降溫效果

6、和降溫率均高于JW兔組。病理組織學(xué)顯示，模型兔肝細(xì)胞水腫，部分胞漿呈空網(wǎng)狀，大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡腔內(nèi)大量水腫液及漏出的紅細(xì)胞，肺泡內(nèi)中性粒細(xì)胞滯留聚集，肺泡擴(kuò)張或萎陷，肺泡間隔明顯增厚，腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，并有局部出血，心肌間質(zhì)輕度充血;而給予布洛芬后改善上述病理形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)論:細(xì)菌內(nèi)毒素對(duì)WHBE兔具有較好的致熱敏感性，適于致熱原物質(zhì)的檢查。采用細(xì)菌內(nèi)毒素能成功建立WHBE兔發(fā)熱模型，且該模型穩(wěn)定易行、重復(fù)性高，