人子宮頸癌M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與T細(xì)胞亞型的相關(guān)性及其調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：探討巨噬細(xì)胞、M2型巨噬細(xì)胞在人子宮頸癌微環(huán)境的分布及其與腫瘤內(nèi)浸潤(rùn)的FOXP3+T、CD8+T細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性，并分析巨噬細(xì)胞、M2型巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與臨床病理特征的相關(guān)性；觀(guān)察巨噬細(xì)胞、M2型巨噬細(xì)胞表達(dá)B7-H4和B7-DC的情況；體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)重組B7-H4蛋白對(duì)宮頸癌患者外周血活化T細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞亞型的影響。
　　方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法觀(guān)察巨噬細(xì)胞和 M2型巨噬細(xì)胞在60例子宮頸癌組織、10例高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)

2、病變組織和10例宮頸組織的分布；用免疫熒光雙標(biāo)染色法分析宮頸癌組織內(nèi)浸潤(rùn)的FOXP3+T細(xì)胞數(shù)量、CD8+T細(xì)胞數(shù)量及粒酶 B分泌情況；并分析上述兩種巨噬細(xì)胞表達(dá)B7-H4和B7-DC的情況。體外分離10例宮頸癌患者外周血T細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)與B7-H4混合培養(yǎng)48h后的活化T細(xì)胞增殖、凋亡及各亞型T細(xì)胞的比例。
　　結(jié)果：
　　1、巨噬細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞大量分布于宮頸癌微環(huán)境，顯著高于高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變及子宮頸組織(

3、P=0.000, P=0.000, P=0.000, P=0.000)。宮頸癌微環(huán)境內(nèi)浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞數(shù)量也明顯多于M2型巨噬細(xì)胞(P=0.000)。
　　2、伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌栓的宮頸癌間質(zhì)巨噬細(xì)胞數(shù)及M2型巨噬細(xì)胞數(shù)均顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌栓的巨噬細(xì)胞及 M2型巨噬細(xì)胞數(shù)(P=0.001, P=0.011;P=0.035, P=0.019)，但巨噬細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞數(shù)與宮頸癌患者年齡，腫瘤浸潤(rùn)深度和組織學(xué)類(lèi)型間無(wú)相關(guān)性(P>0

4、.05)。
　　3、60例宮頸癌組織中，間質(zhì)內(nèi)有較多的CD8+T和FOXP3+T細(xì)胞浸潤(rùn)，計(jì)數(shù)每例5個(gè)高倍視野的細(xì)胞平均數(shù)，F(xiàn)OXP3+T細(xì)胞為84.45±37.90，CD8+T細(xì)胞為126.75±78.19，但分泌粒酶B的CD8+T細(xì)胞明顯減少，為72.4±36.51。
　　4、宮頸癌組織中巨噬細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞與FOXP3+Tregs細(xì)胞數(shù)之間均呈正相關(guān)(r=0.317，P=0.014；r=0.294，P=0.023)

5、，與 CD8+T細(xì)胞數(shù)及粒酶B分泌細(xì)胞數(shù)無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。
　　5、在宮頸癌間質(zhì)內(nèi)，M2型巨噬細(xì)胞可表達(dá) B7-H4，但不表達(dá)B7-DC；而巨噬細(xì)胞均不表達(dá)B7-H4或B7-DC。
　　6、宮頸癌患者外周血活化 T淋巴細(xì)胞與重組 B7-H4蛋白共培養(yǎng)48h后，B7-H4組CD4+T、CD8+T細(xì)胞的Ki67指數(shù)為(11.45±2.24)％和(2.78±1.01)%，而空白組則分別為和(10.30±1.72)%和(3.

6、48±1.23)%，無(wú)明顯差異。T細(xì)胞亞群占比分別為：B7-H4組和空白組CD4+T/CD3+T細(xì)胞為(42.1±1.9)%和(39.8±2.6)%；CD8+T/CD3+T細(xì)胞為(36.1±3.7)%和(56.2±2.2)%(P<0.05)；CD4+T/CD8+T細(xì)胞為1.17，高于空白組的0.71；FOXP3+T占CD4+T細(xì)胞的百分比為55.4%，高于空白組的52.4%。凋亡率分別為：B7-H4組和空白組總 T細(xì)胞凋亡率為(27.8

7、±3.29)%和(25.1±1.98)%，其中 CD4+T細(xì)胞的凋亡率分別為(26.9±2.05)%和(24.8±2.17)%，而CD8+T細(xì)胞凋亡率為(36.1±2.34)%，明顯高于空白組(28.0±2.36)%(P<0.05)。
　　結(jié)論：巨噬細(xì)胞和 M2型巨噬細(xì)胞在宮頸癌微環(huán)境內(nèi)大量分布，與浸潤(rùn)的FOXP3+T細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)，也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌栓有關(guān)。M2型巨噬細(xì)胞可通過(guò)表達(dá)B7-H4，促進(jìn)CD8+T細(xì)胞凋亡，但對(duì)Tre