Ezrin蛋白、CD44v6與子宮頸癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究.pdf

1、子宮頸癌是發(fā)病率比較高的女性生殖道惡性腫瘤，它的發(fā)生、發(fā)展是一個極為復(fù)雜的病理過程，是多因素、多基因參與、共同作用的結(jié)果。在探討子宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的過程中，分子生物學(xué)的研究提供了比較可靠的理論依據(jù)，提示89％以上的子宮頸癌患者伴有人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)的感染。除此之外，抑癌基因的失活和宿主癌基因的激活、某些生長因子、細(xì)胞因子及其受體也與子宮頸癌的形成和發(fā)展有一定的促進(jìn)作用。目前浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤

2、重要的生物學(xué)特性之一，是惡性腫瘤患者死亡的主要原因。根據(jù)統(tǒng)計，大約有70％的惡性腫瘤患者死于腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移[1]，所以如何來控制和預(yù)防惡性腫瘤患者的轉(zhuǎn)移是提高腫瘤患者生存率以及改善預(yù)后的關(guān)鍵所在。
　　 近年來，有研究發(fā)現(xiàn)了埃茲蛋白(Ezrin)在腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移的過程中起著非常重要的生物學(xué)作用[2]。埃茲蛋白是Bretscher在雞的腸上皮細(xì)胞的微絨毛中發(fā)現(xiàn)的，是ERM蛋白分子家族成員之一，是一種特別的膜細(xì)胞骨架連接的蛋白，它

3、由585個氨基酸殘基組成，分子量約為82ku，定位于染色體6q25-q26上，主要來參與上皮細(xì)胞的膜動力學(xué)，集中于富含肌動蛋白細(xì)胞的微絨毛里以及細(xì)胞膜的皺襞中。Ezrin蛋白的過度表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲，并且與不同組織來源的多種腫瘤的轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。有研究報道，Ezrin蛋白的過度表達(dá)不僅是腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲的充分條件，而且也是必要條件[3]。Ezrin蛋白與跨膜細(xì)胞黏附因子的連接是其重要的生理功能之一，它通過參與調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附因子之

4、間的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用，形成細(xì)胞外基質(zhì)-黏附因子-Ezrin蛋白-細(xì)胞骨架復(fù)合體，參與了細(xì)胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞的運動[4]，借此來調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的組裝和收縮以及細(xì)胞的基因表達(dá)。
　　 CD44是細(xì)胞黏附分子家族，其密切聯(lián)系著腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移。CD44根據(jù)外顯子的表達(dá)方式不同，分為變異型(CD44v)和標(biāo)準(zhǔn)型(CD44s)。CD44v在腫瘤中的表達(dá)極其豐富，主要分布于組織的上皮

5、細(xì)胞中。CD44v包括三種亞型：CD44v3、C044v5、CD44v6。
　　 CD44v6為細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，多種人體惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移均與CD44v6的過表達(dá)相關(guān)。CD44v6的主要功能是與細(xì)胞骨架連接蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞偽足的形成，并且與細(xì)胞的遷徙運動相關(guān)；CD44v6可識別并結(jié)合相應(yīng)的配體，參與細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附；其作為細(xì)胞基質(zhì)的透明質(zhì)酸受體，可以改變腫瘤細(xì)胞表面黏附因子的功能和構(gòu)成，有利于腫

6、瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和擴散[5]。
　　 目的：CD44v6和Ezrin蛋白在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中的具體機制尚不十分明確，有研究表明Ezrin蛋白可直接或者間接的與細(xì)胞表面黏附分子CD44v6等結(jié)合，進(jìn)一步來調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的黏附性，影響腫瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲[6]，而細(xì)胞膜一細(xì)胞骨架連接蛋白Ezrin蛋白功能的激活也可被CD44v6分子的過表達(dá)而引起，從而加強腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力。國內(nèi)就Ezrin蛋白和CD44v6在子宮頸癌中的相關(guān)性研究未見報道。

7、本研究通過檢測膜細(xì)胞骨架連接蛋白(Ezrin)及CD44v6分子在子宮頸癌組織中的表達(dá)，來探討其二者在子宮頸癌轉(zhuǎn)移中的作用及相關(guān)性。
　　 方法：選取2005-2010年河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院、石家莊市第二醫(yī)院以及保定市第一中心醫(yī)院經(jīng)手術(shù)切除、并經(jīng)病理組織學(xué)檢查證實的宮頸組織標(biāo)本95例，將其分為三組，A組為宮頸癌組織35例，其中有淋巴轉(zhuǎn)移組(A1組)25例，無淋巴轉(zhuǎn)移組(A2組)10例；B組為宮頸上皮內(nèi)瘤變(

8、cervical intraepithelial neoplasia，CIN)組織30例；C組為正常宮頸組織或者伴有慢性宮頸炎組織30例，所有標(biāo)本術(shù)前均未經(jīng)過放射及化學(xué)治療。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測Ezrin蛋白及CD44v6的表達(dá)。所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計算陽性率，率間采用x2檢驗及連續(xù)校正x2檢驗，四格表資料采用Fisher確切概率法，兩指標(biāo)間的相關(guān)性應(yīng)用Spearman進(jìn)行直線相關(guān)分析。
　　

9、 結(jié)果：
　　 1、Ezrin蛋白沿細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)呈線性分布，并在細(xì)胞質(zhì)中呈棕黃色顆粒分布，其陽性信號位于宮頸癌細(xì)胞或者宮頸上皮內(nèi)瘤變細(xì)胞中，但是在正常宮頸組織細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn)Ezrin蛋白的表達(dá)。Ezrin蛋白在A組、B組、C組的陽性表達(dá)率分別為65.7％、30.0％、0.0％，A、B、C三組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000<0.05)；A組與B、C兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004、P=0.000<0.0125)，B

10、組與C組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.009(0.0125)。A1組Ezrin蛋白的陽性表達(dá)率為80.0％，A2組Ezrin蛋白的陽性表達(dá)率為30.0％，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.015<0.05)。
　　 2、CD44v6沿細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)呈線性分布，并在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中呈棕黃色顆粒樣表現(xiàn)，其陽性信號位于宮頸癌細(xì)胞、宮頸上皮內(nèi)瘤變細(xì)胞或正常宮頸組織細(xì)胞的胞質(zhì)或胞膜中。CD44v6在A組、B組、C組的陽性表達(dá)率分別為82.

11、9％、46.7％、10.0％，A、B、C三組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000<0.05)；AM與B、C兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004、P=0.000<0.0125)，B組與C組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.005<0.0125)。A1組CD44v6的陽性表達(dá)率為96.0％，A2組CD44v6的陽性表達(dá)率為50.0％，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004<0.05)。
　　 3、Ezrin蛋白和CD44v

12、6在子宮頸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性：
　　 Ezrin蛋白與CD44v6在子宮頸癌組織中的表達(dá)水平顯著高于正常宮頸組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織，且有淋巴轉(zhuǎn)移組顯著高于無淋巴轉(zhuǎn)移組，二者呈正相關(guān)(r=0.739，P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1、Ezrin蛋白、CD44v6在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率呈顯著的遞增趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；
　　 2、宮頸癌伴淋巴