感染期子宮頸癌U14細(xì)胞荷瘤小鼠抑制巨噬細(xì)胞CCL5分泌的機(jī)制研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。珊螻轢伊刷程導(dǎo)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的

2、研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名’彳少≥導(dǎo)師簽章：勿t工年；月名。日中文摘要感染期子宮頸癌U14細(xì)胞荷瘤小鼠抑制巨噬細(xì)胞CCL5分泌的機(jī)制研究摘要目的：探討感染期子宮頸癌U14細(xì)胞荷瘤小鼠抑制巨噬細(xì)胞分泌正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌趨化因子5(RANTES／CCL5)的機(jī)制。方法：取68周齡的雌性C57BL／

3、6小鼠，隨機(jī)分為4組，每組6只。無瘤組：皮下注射培養(yǎng)基；荷瘤組：皮下注射U14細(xì)胞；無瘤脂多糖(LPS；用于誘導(dǎo)小鼠感染)組：皮下注射培養(yǎng)基，腹腔內(nèi)注射LPS；荷瘤LPS組：皮下注射U14細(xì)胞，腹腔內(nèi)注射LPS。l采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法及熒光定量PCR(QPCR)技術(shù)檢測(cè)各組小鼠血清及炎性細(xì)胞中CCL5和前列腺素2(PGE2)的表達(dá)。2提取感染期荷瘤小鼠血清制備腫瘤條件培養(yǎng)基(TCM)，在體外誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞，檢測(cè)誘導(dǎo)感染前、

4、后各組上清液和巨噬細(xì)胞中CCL5、PGE2和環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的表達(dá)。3選用環(huán)氧化酶2(COX2)抑制劑一NS一398阻斷PGE2的產(chǎn)生，檢測(cè)誘導(dǎo)感染前、后各組上清液和巨噬細(xì)胞中CCL5、PGE2和環(huán)c—心佃的表達(dá)。4選用蛋白激酶A(PKA)阻滯劑H89阻斷cAMP／PKA信號(hào)通路，檢測(cè)各組上清液和巨噬細(xì)胞中PGE2、CCL5和cAⅧ的表達(dá)。結(jié)果：1荷瘤組小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬細(xì)胞中CCL5mRNA的表達(dá)水平(151343

5、5355pg／ml：1)均明顯低于無瘤組(6908184852pg／ml；4530848)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。其血清中PGE2蛋白含量及巨噬細(xì)胞中PGE2mRNA的表達(dá)水平(119849士8273lpg／ml；575士0777)均明顯高于無瘤組(1868425455pg／ml；1)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。無瘤LPS組小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬細(xì)胞中CCL5mRNA的表達(dá)水平(404934士141421pg／