MicroRNa-597在乳腺癌中的表達(dá)及調(diào)控機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：
　　為了研究miR-597在乳腺癌中的表達(dá)，尤其是其對乳腺癌增殖，遷移侵襲的作用以及該過程所涉及的分子機(jī)制。
　　方法：
　　1.用實(shí)時熒光定量PCR檢測38對臨床標(biāo)本及乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和SK-BR-3中miR-597的表達(dá)水平。
　　2.在腫瘤細(xì)胞中瞬時轉(zhuǎn)染miR-597mimics，并用MTT實(shí)驗(yàn)、EdU實(shí)驗(yàn)及流式周期實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的增殖能力，用劃痕實(shí)驗(yàn)及transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測乳腺

2、癌細(xì)胞的體外遷移和侵襲的能力。
　　3.結(jié)合生物信息學(xué)方法預(yù)測miR-597的靶基因，并用Q-PCR、雙熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)及蛋白印記法驗(yàn)證;隨后敲減及挽救靶基因，結(jié)合功能實(shí)驗(yàn)判斷靶基因的準(zhǔn)確性。
　　4.利用實(shí)時熒光定量PCR驗(yàn)證miR-597與FOSL2間的相互關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.與正常組織和細(xì)胞比較，乳腺癌組織及MDA-MB-231和SK-BR-3細(xì)胞中miR-597均呈低表達(dá);
　　2.與對照相