毛蕊異黃酮對乳腺癌細胞增殖的影響及其作用機制的探討.pdf

1、目的：
　　毛蕊異黃酮是黃芪的主要成分之一，也是天然的植物雌激素，其結(jié)構(gòu)與雌激素的結(jié)構(gòu)相似。在以往的研究中其在抗病毒以及抗心血管等疾病中表現(xiàn)出一定的效應，尤其在對人類惡性腫瘤增殖的抑制作用方面受到廣泛關(guān)注。在我們之前的實驗研究結(jié)果中，我們觀察到毛蕊異黃酮可以抑制乳腺癌細胞的增殖，誘導凋亡，但具體機制有待進一步探討。本實驗擬對毛蕊異黃酮抑制乳腺癌細胞增殖的能力及其相關(guān)機制做進一步深入的研究。
　　方法：
　　培養(yǎng)MCF-

2、7和T-47D兩種乳腺癌細胞株。MTT法對不同濃度毛蕊異黃酮作用于乳腺癌細胞MCF-7細胞和T-47D細胞24h、48h、72h后的OD值的檢測。Hoechst33258熒光染色檢測不同濃度藥物處理后MCF-7細胞的凋亡形態(tài)。熒光定量PCR檢測方法檢測于不同濃度的毛蕊異黃酮作用于的乳腺癌MCF-7細胞和T-47D細胞后，RCAS1因子的基因表達。通過用蛋白免疫印跡（Western Blot）方法分別檢測MCF-7細胞和T-47D細胞中的

3、Foxp3、RCAS1和VEGF蛋白因子的表達水平。
　　結(jié)果：
　　在MTT實驗中，乳腺癌MCF-7和T-47D細胞的增殖活性隨毛蕊異黃酮藥物濃度的增加呈逐漸降低趨勢，通過以上實驗結(jié)果選取不同的藥物濃度進行進一度的實驗研究。通過Hoechst33258染色實驗，我們觀察到隨藥物濃度的增高，細胞凋亡數(shù)量增多。我們從細胞的基因及蛋白表達水平等進一步研究毛蕊異黃酮對癌細胞的抑制作用。通過熒光PCR實驗表明，兩種乳腺癌細胞株經(jīng)毛蕊

4、異黃酮作用后，細胞內(nèi)RCAS1的mRNA表達量上升，且與毛蕊異黃酮呈劑量大小呈相關(guān)性。WB結(jié)果表明，體外培養(yǎng)的MCF-7細胞和T-47D細胞中Foxp3和VEGF蛋白因子的表達量水平隨毛蕊異黃酮濃度的增高而表達水平下降，而RCAS1蛋白因子的表達水平隨毛蕊異黃酮濃度的增高表達水平上升。
　　結(jié)論：
　　植物雌激素毛蕊異黃酮通過影響細胞內(nèi)RCAS1蛋白表達水平增高，并降低Foxp3和VEGF的表達水平，抑制乳腺癌MCF-7細胞