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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:血鏈球菌細(xì)菌素對(duì)光滑念珠菌菌體的楊氏模量、形變量、粘附力的影響
1.分別探討光滑念珠菌菌體的形變量、粘附力、楊氏模量的大小
2.分別探討不同濃度下的血鏈素對(duì)光滑念珠菌形變量,粘附力及楊氏模量的影響
方法:
1.血鏈球菌細(xì)菌素的提取:將血鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC10556)進(jìn)行復(fù)蘇傳代,利用離心破碎等方法從血鏈球菌中提取血鏈素,然后用 PBS將血鏈素稀釋成不同濃度(0.25g/L、0.5g/L、
2、1g/L).
2.光滑念珠菌的培養(yǎng):將光滑念珠菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC15126)進(jìn)行復(fù)蘇傳代
3.利用原子力顯微鏡(AFM)鏡下接觸式,采用相對(duì)測(cè)量法(基準(zhǔn)值調(diào)整為3.5Mpa)分別測(cè)量光滑念珠菌菌體的粘附力,楊氏模量及形變量值.
4.不同濃度的血鏈素作用光滑念珠菌:將0.25g/L、0.5g/L、1g/L濃度的血鏈素200ul,濃度5×106cfu/ml的光滑念珠菌菌懸液500ul加入到1mL的RPMI164
3、0培養(yǎng)基中,放置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),12h后取片待檢。
5.利用原子力顯微鏡鏡下接觸模式,采用相對(duì)測(cè)量法(基準(zhǔn)值調(diào)整為3.5Mpa)測(cè)得經(jīng)血鏈素作用后的光滑念珠菌菌體的形變量、粘附力及楊氏模量值的改變。
結(jié)果:
1.光滑念珠菌的培養(yǎng):生長(zhǎng)出淡紫色、表面光滑形態(tài)似乳酪樣的細(xì)小菌落。
2.正常光滑念珠菌菌體的形變量為70.38±1.31nm,粘附力平均值為7.31±0.53nN,楊氏模量的平均值
4、為7.14±0.39Mpa。
3.不同濃度的血鏈素作用光滑念珠菌后,原子力顯微鏡呈像顯示光滑念珠菌菌體發(fā)生了不同程度的扭曲變形,表面變粗糙,并形成了大小不一的盤狀凹陷。
4.不同濃度的血鏈素作用光滑念珠菌后,其粘附力、楊氏模量、形變量值分別發(fā)生變化。0.25g/L的血鏈素作用光滑念珠菌菌體的形變量為80.48±7.69nm,平均粘附力為6.91±0.76nN,平均楊氏模量為6.78±0.68Mpa;0.5g/L的血鏈
5、素作用光滑念珠菌菌體的形變量為118.18±30.34nm,平均粘附力為6.42±1.04nN,平均楊氏模量為5.94±1.02Mpa;1g/L的血鏈素作用光滑念珠菌菌體的形變量為246.55±87.48nm,平均粘附力為5.61±0.88nN,平均楊氏模量為4.75±1.28Mpa。
結(jié)論:
1.血鏈素可導(dǎo)致光滑念珠菌菌體的形變量、粘附力、楊氏模量值發(fā)生改變。
2.0.25g/L、0.5g/L、1g/L濃
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