糖尿病大鼠銅綠假單胞菌感染創(chuàng)面自噬表達(dá)的探究.pdf

1、目的：探究：1.糖尿病及銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）感染對(duì)SD(Sprague Dawley)大鼠創(chuàng)面肉芽組織自噬相關(guān)蛋白-微管結(jié)合蛋白輕鏈3(microtubule-associated protein light chain3，LC3Ⅱ)的影響。2.糖尿病和（或）銅綠假單胞菌感染狀態(tài)下，自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素對(duì)SD大鼠創(chuàng)面肉芽組織自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ的影響。
　　方法：根據(jù)是否患有糖尿病及合并

2、PA感染將48只7周齡SD大鼠隨機(jī)分為以下4個(gè)組：非糖尿病非感染組，非糖尿病感染組，糖尿病非感染組，糖尿病感染組，每組大鼠為12只。隨后，根據(jù)是否予以藥物雷帕霉素干預(yù)將各組大鼠隨機(jī)分為以下2個(gè)亞組：無(wú)藥物組和雷帕霉素組，每亞組大鼠為6只。采用打孔器于各組大鼠背部制作直徑為1cm的全層皮膚潰瘍，并于造模當(dāng)天及造模后第7天取血測(cè)C反應(yīng)蛋白水平。于造模當(dāng)天及造模后第7天分別取創(chuàng)面皮下組織或肉芽組織，應(yīng)用蘇木精—伊紅染色法（HE）觀察創(chuàng)面皮下組

3、織及肉芽組織基本病理形態(tài)及特征，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法測(cè)定各組大鼠創(chuàng)面皮下組織及肉芽組織中自噬相關(guān)蛋白 LC3Ⅱ的表達(dá)情況，并密切觀察各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織生長(zhǎng)情況，尤其是感染組大鼠創(chuàng)面感染控制情況，分析糖尿病狀態(tài)、PA感染及其狀態(tài)下雷帕霉素對(duì)自噬表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果：潰瘍模型制作當(dāng)天，各組大鼠之間 C反應(yīng)蛋白水平、創(chuàng)面皮下組織自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ的表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均p＞0.05）。
　　模型制作成功后第7天，在非糖尿病

4、感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組相比，雷帕霉素組大鼠血清中C反應(yīng)蛋白水平較低[(11.6±0.57）vs.(9.15±0.27), p=0.000]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在糖尿病感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組相比，雷帕霉素組大鼠血清中C反應(yīng)蛋白水平較低[(11.2±0.74）vs.(9.94±0.37), p=0.008]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　與非糖尿病非感染組大鼠相比，糖尿病非感染組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織LC3Ⅱ的表達(dá)量較低[(0.18±0.

5、015）vs.(0.28±0.030), p=0.001]。與非糖尿病感染組大鼠相比，糖尿病感染組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織中LC3Ⅱ表達(dá)水平較低[(0.21±0.020) vs.(0.39±0.030), p=0.000]。與非糖尿病非感染組大鼠相比，非糖尿病感染組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織 LC3Ⅱ表達(dá)水平較高[(0.39±0.030) vs.(0.28±0.030), p=0.001]。與糖尿病非感染組大鼠相比，糖尿病感染組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組

6、織LC3Ⅱ表達(dá)水平較高[(0.21±0.020) vs.(0.18±0.010), p=0.033]，。
　　在非糖尿病非感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組大鼠相比，雷帕霉素組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織LC3Ⅱ的表達(dá)水平較高[(0.37±0.030) vs.(0.28±0.030), p=0.004]。在非糖尿病感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組大鼠相比，雷帕霉素組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織LC3Ⅱ的表達(dá)水平較高[(0.54±0.030) vs.(0.39±0.03

7、0), p=0.000]。在糖尿病非感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組大鼠相比，雷帕霉素組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織 LC3Ⅱ的表達(dá)水平較高[(0.21±0.010) vs.(0.18±0.010), p=0.009]。在糖尿病感染組，與相應(yīng)無(wú)藥物組大鼠相比，雷帕霉素組大鼠背部創(chuàng)面肉芽組織內(nèi) LC3Ⅱ的表達(dá)水平較高[(0.30±0.020) vs.(0.21±0.010), p=0.001]。與非糖尿病非感染組大鼠相比，糖尿病非感染組大鼠應(yīng)用雷帕霉素后，

8、背部創(chuàng)面肉芽組織 LC3Ⅱ表達(dá)水平升高的的幅度較小(22％vs.32%)。與非糖尿病感染組大鼠相比，糖尿病感染組大鼠應(yīng)用雷帕霉素后，背部創(chuàng)面肉芽組織LC3Ⅱ表達(dá)水平升高的幅度較小(37%vs.39%)。與非糖尿病非感染組大鼠相比，非糖尿病感染組大鼠應(yīng)用雷帕霉素后，背部創(chuàng)面肉芽組織LC3Ⅱ表達(dá)水平升高的幅度較大(39% vs.32%)。與糖尿病非感染組大鼠相比，糖尿病感染組大鼠應(yīng)用雷帕霉素后，背部創(chuàng)面肉芽組織 LC3Ⅱ表達(dá)水平的升高幅度較