靶向腫瘤相關(guān)重要蛋白BRD4和RHOA小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制的研究.pdf

1、近年來，隨著生物醫(yī)藥領(lǐng)域的迅猛快速發(fā)展，靶向特定蛋白篩選其特異性的小分子抑制劑已成為該領(lǐng)域的重點(diǎn)。本文中著眼于表觀遺傳相關(guān)蛋白及細(xì)胞骨架類蛋白這兩個不同的領(lǐng)域中的重要蛋白進(jìn)行小分子抑制劑的篩選。
　　組蛋白乙?；鳛楸碛^遺傳學(xué)中重要的一類翻譯后修飾，在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄與染色體構(gòu)成等多個領(lǐng)域中發(fā)揮著重要的作用，并且與癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，因此，組蛋白乙?；殉蔀閲鴥?nèi)外的研究熱點(diǎn)。BRD4蛋白作為組蛋白乙?；R別因子”reader”，是

2、屬于BET家族的一員，它能夠特異性結(jié)合乙?；揎椀馁嚢彼?，并招募其他轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控BCL2，CDK6，c-Myc等下游致癌基因。目前研究表明，BRD4的異常表達(dá)與MLL，AML等白血病以及睪丸中腺癌等眾多疾病相關(guān)，因此靶向BRD4蛋白篩選小分子抑制劑是十分有必要的，在本文中，我們利用BRD4蛋白可以識別乙酰化的賴氨酸這一原理，結(jié)合AlphaScreen技術(shù)靈敏均相無放射性等優(yōu)點(diǎn)，我們建立了BRD4的“HITs”篩選平臺，初步篩選得到了一類

3、骨架新穎，活性較好的小分子抑制劑，該小分子在體外可以在0.81土0.03 uM左右顯著抑制BRD4蛋白識別乙?；慕M蛋白，不僅如此該化合物在細(xì)胞水平還可以抑制血液病細(xì)胞的增殖等，因此其是一個潛在的成藥的小分子。
　　RhoA作為GTP酶的一種，是重要的細(xì)胞信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，并影響細(xì)胞骨架的形態(tài)等，屬于小G蛋白家族的一員。RhoA與上游的三種蛋白相互作用，并受這三種蛋白的調(diào)控，從而在RhoA-GTP活性狀態(tài)及RhoA-GDP非活性狀