A1CF抑制大鼠腎臟近曲小管上皮細胞的上皮-間質轉化及其遷移能力.pdf

1、目的:
　　探討Apobec-1互補因子(A1CF)在C57BL/6小鼠腎臟中的表達，以及A1CF對腎小管上皮細胞上皮-間質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）過程的影響，初步闡明A1CF在哺乳動物腎臟中可能的生物學功能。
　　方法:
　　1.利用整胚原位雜交實驗檢測A1CF在C57BL/6小鼠腎臟發(fā)育過程中的表達情況；利用切片原位雜交實驗檢測A1CF在成年C57BL/6小

2、鼠腎臟中的具體表達部位。
　　2.在大鼠腎臟近曲小管上皮細胞NRK52e中過表達A1CF，利用western-blot及免疫熒光實驗檢測該細胞的上皮-間質轉化過程中相關標志蛋白的變化；利用細胞劃痕實驗測定該細胞遷移能力的改變。
　　3.采用人工合成的A1CF-rat-siRNA敲低NRK52e細胞內源性A1CF表達，利用western-blot及免疫熒光實驗檢測該細胞的上皮-間質轉化過程中相關標志蛋白的變化；利用細胞劃痕實驗

3、測定該細胞遷移能力的改變。
　　結果:
　　1.原位雜交結果顯示A1CF在C57BL/6小鼠腎臟發(fā)育早期不表達，自胚胎期15.5天開始表達，并且在成年腎臟中集中表達在腎小管中。
　　2.在大鼠腎臟近曲小管上皮細胞NRK52e中過表達A1CF抑制了該細胞的上皮-間質轉化過程及細胞遷移能力，A1CF的兩種剪切變體(A1CF/A1CF(-8AA))在上述過程中具有相似的作用。
　　3.利用A1CF的siRNA敲低NRK