地西他濱聯(lián)合沙利度胺治療高危骨髓增生異常綜合征外周血PD-1、CTLA-4、細胞因子的表達變化及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討高危骨髓增生異常綜合癥（myelodysptastic syndrome，MDS）患者經(jīng)地西他濱聯(lián)合沙利度胺治療前后外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T、Treg細胞上程序性死亡分子-1（programmed death-1，PD-1）、細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen4，CTLA-4）表達，細胞因子干擾素γ（interferon-γ，IFN-

2、γ）、白介素4（interleukin-4，IL-4）、白介素10（interleukin-10，IL-10）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）和轉(zhuǎn)化生長因子β（trans-forming growth factorβ，TGF-β）水平的變化和分析T細胞亞群上表達PD-1、CTLA-4與細胞因子水平之間的相關(guān)性。
　　方法：收集18例不同亞型高度危險分層的初治MDS患者和12例

3、健康對照者，患者均使用地西他濱聯(lián)合沙利度胺治療3個療程以上（包含3個療程）；采用流式細胞技術(shù)檢測患者治療前后組及健康對照組外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T、Treg細胞上PD-1、CTLA-4表達。同時，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測MDS患者及健康對照組外周血細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、TNF-α和TGF-β水平。并進一步分析T細胞亞群上

4、表達PD-1、CTLA-4與細胞因子水平之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：1.高危MDS治療前組與健康對照組相比，CD3+T細胞上PD-1的表達升高（19.74±2.08％vs5.28±1.60%，P＜0.001）；CD4+T細胞上PD-1的表達顯著升高（35.35±2.49%vs2.64±0.79%，P＜0.001）；CD8+T細胞上PD-1的表達升高（24.50±1.47%vs3.46±0.31%，P＜0.001）及Treg細胞上PD

5、-1表達明顯升高（41.31±4.50%vs5.01±1.79%，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。高危MDS治療后組與治療前組相比，CD3+T細胞上PD-1表達明顯下降（8.21±2.20%vs19.74±2.08%，P＜0.001）；CD4+T細胞上PD-1的表達明顯下降（6.64±1.52%vs35.35±2.49%，P＜0.001）；CD8+T細胞上PD-1的表達下降（5.61±1.12%vs24.50±1.47%，P＜0.

6、001）及Treg細胞上PD-1表達顯著降低（7.68±1.73%vs41.31±4.50%，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。2.高危MDS治療前組與健康對照組相比，CD3+T細胞上CTLA-4的表達明顯升高（9.71±1.45%vs0.46±0.57%，P＜0.001）；CD4+T細胞上CTLA-4表達升高（3.68±1.17%vs0.70 ±0.58%，P＜0.01）；CD8+T細胞上CTLA-4表達升高（7.64±

7、1.69%vs1.51±0.61，P＜0.001）及Treg細胞上CTLA-4表達顯著升高（14.57±1.87%vs2.69±1.44%，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。高危MDS治療后組與治療前相比，CD3+T細胞上CTLA-4表達明顯下降（2.42±1.09%vs9.71±1.45%，P＜0.001）；CD4+T細胞上CTLA-4的表達下降（1.96±0.23%vs3.68±1.17%，P＜0.001）；CD8+T細胞上CT

8、LA-4的表達下降（3.57±0.96%vs7.64±1.69%，P＜0.001）及Treg細胞上CTLA-4表達明顯下降（6.43±1.98%vs14.57±1.87%，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。3.高危MDS治療前組與健康對照組相比，IFN-γ水平增高（10.61±1.47vs5.59±0.36，P＜0.001），IL-4水平明顯增高（11.58±1.86vs7.66±1.05，P＜0.001），TGF-β水平增高（29

9、.53±1.60vs16.74±1.16，P＜0.001），TNF-α水平明顯升高（24.27±0.88vs7.05±0.78，P＜0.001），IL-10水平顯著增高（78.39±2.38vs9.63±0.38，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。高危MDS治療后組與治療前組相比，IFN-γ水平降低（7.63±1.28vs10.61±1.47，P＜0.001），IL-4水平降低（9.35±1.09vs11.58±1.86，P＜0.0

10、01），TGF-β水平明顯降低（19.48±1.50vs29.53±1.60，P＜0.001），TNF-α水平顯著降低（10.45±0.49vs24.27±0.88，P＜0.001），IL-10水平明顯下降（15.65±1.00vs78.39±2.38，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。4.MDS患者治療前CD8+T細胞表達PD-1與血清IFN-γ水平呈正相關(guān)（r=0.876，P＜0.01）；MDS患者治療前CD4+T細胞表達PD-

11、1與血清IFN-γ水平呈正相關(guān)（r=0.538，P＜0.05）；MDS患者治療前CD3+T細胞表達PD-1與血清IFN-γ水平呈正相關(guān)（r=0.499，P＜0.05）；MDS患者治療前Treg細胞表達PD-1與血清IFN-γ水平呈正相關(guān)（r=0.921，P＜0.001）；MDS患者治療前CD3+T細胞表達CTLA-4與血清IL-10水平呈正相關(guān)（r=0.885，P＜0.001）；MDS患者治療前CD4+T細胞表達CTLA-4與血清IL-

12、10水平呈正相關(guān)（r=0.781，P＜0.001）；MDS患者治療前CD8+T細胞表達CTLA-4與血清IL-10水平呈正相關(guān)（r=0.803，P＜0.001）；MDS患者治療前Treg細胞表達CTLA-4與血清IL-10水平呈正相關(guān)（r=0.726，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：1.初治高危MDS患者治療前外周血PD-1及CTLA-4在CD3+T、CD4+T、CD8+T和Treg細胞上表達顯著升高，T細胞免疫

13、功能紊亂可能參與MDS發(fā)??；2.初治高危MDS患者治療前外周血細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、TNF-α和TGF-β水平增高，免疫微環(huán)境中細胞因子水平的改變可能參與MDS發(fā)病。3.初治高危MDS患者治療前T細胞亞群上表達的PD-1與外周血細胞因子IFN-γ水平呈正相關(guān)及初治高危MDS患者治療前T細胞亞群上表達的CTLA-4與外周血細胞因子IL-10水平呈正相關(guān)，提示IFN-γ和IL-10與T細胞亞群上表達的PD-1及CTLA-