骨髓增生異常綜合征中與地西他濱代謝相關(guān)基因及其耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本研究旨在比較研究骨髓增生異常綜合征（MDS）患者中與地西他濱（decitabine）代謝相關(guān)基因mRNA水平的表達(dá)及與患者預(yù)后之間的關(guān)系，并探討地西他濱耐藥可能的機(jī)制。
　　方法：采集經(jīng)地西他濱治療的34名MDS患者骨髓標(biāo)本，使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)人1型平衡型核苷轉(zhuǎn)運(yùn)體（hENT1）、脫氧胞苷激酶（DCK）及胞苷脫氨酶（CDA）在地西他濱治療有效及無(wú)效患者間mRNA水平表達(dá)的差異，并在SKM-1細(xì)胞系中沉默hEN

2、T1基因，經(jīng)不同濃度地西他濱（0.5、1、5μmol/L）、不同時(shí)間點(diǎn)（24h、48h、72h）作用后，檢測(cè)SKM-1干擾組及對(duì)照組細(xì)胞的增殖、細(xì)胞凋亡、p15INK4B去甲基化水平等方面的變化。
　　結(jié)果：實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果示地西他濱治療有效的18名MDS患者的hENT1 mRNA表達(dá)水平明顯高于16名經(jīng)地西他濱治療無(wú)效的MDS患者（2.95±3.12 vs1.23±0.73；p=0.035），DCK在治療無(wú)效患者中的表達(dá)量

3、低于治療有效組（0.39±0.49 vs0.60±0.99；p=0.417），CDA在治療無(wú)效患者中高于治療有效患者（1.03±0.71 vs0.62±0.68；p=0.091）。根據(jù)34名MDS患者h(yuǎn)ENT1 mRNA表達(dá)水平，將患者分為高于平均水平組及低于平均水平組，高于平均表達(dá)水平的MDS患者總體生存時(shí)間（overall survival，OS）長(zhǎng)于其他患者。在SKM-1細(xì)胞系中，經(jīng)0.5、1、5μmol/L地西他濱作用24、48

4、及72h后，相對(duì)于同時(shí)期hENT1對(duì)照組，hENT1干擾組的增殖抑制率均明顯下降（p<0.05），其中72h、5μmol/L地西他濱作用最為明顯，hENT1干擾組和對(duì)照組的增殖抑制率分別為（33.03±2.47）％和（49.41±4.02）%（p=0.007）；蛋白 Caspase-3的剪切體表達(dá)水平也顯著低于hENT1對(duì)照組，并且p15INK4B去甲基化水平也顯著降低。
　　結(jié)論：地西他濱治療有效的MDS患者h(yuǎn)ENT1 mRNA