長期攝入臘腸對(duì)大鼠肝臟的作用及血清代謝組學(xué)研究.pdf

1、目的:觀察長期攝入臘腸以及二甲基亞硝胺(NDMA)對(duì)大鼠機(jī)體產(chǎn)生影響的動(dòng)態(tài)過程，以及其可能導(dǎo)致的肝臟損害，以及探討和尋找能夠區(qū)分肝臟損傷不同階段（肝炎-肝纖維化-肝硬化-肝癌）的特征代謝物及其潛在應(yīng)用價(jià)值，以輔助臨床診斷。
　　方法:雄性SD大鼠(200.8g±23.9g)按體重隨機(jī)分為五組:空白對(duì)照組，18％臘腸對(duì)照組（飼料中添加18％普通臘腸），18％臘腸組（飼料中添加18％NDMA超標(biāo)臘腸），36％臘腸組（飼料中添加36％N

2、DMA超標(biāo)臘腸）和陽性對(duì)照組（飲用水中含NDMA30ug/L）。連續(xù)喂養(yǎng)33周，其中陽性對(duì)照組喂養(yǎng)至12周后更換為普通飲用水。在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行第7周、17周、25周和33周時(shí)，采集大鼠的肝臟和血液樣本，進(jìn)行組織病理學(xué)檢測、生化指標(biāo)檢測，同時(shí)應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用儀對(duì)血清進(jìn)行代謝組學(xué)分析。
　　結(jié)果:病理結(jié)果顯示，第7、17、25、33周時(shí)陽性對(duì)照組肝臟分別出現(xiàn)了肝炎、肝纖維化、肝硬化、肝癌的病理改變;比較同一時(shí)間段五組之間

3、的肝臟病理改變發(fā)現(xiàn)，空白對(duì)照組的肝臟病變最輕，在7、17、25周時(shí)肝臟仍是正常的;18％臘腸對(duì)照組、18％臘腸組和36％臘腸組的病變程度依次加深，但均比陽性對(duì)照組的病變輕。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，36％臘腸組的肝臟出現(xiàn)了硬化的病理改變，沒有發(fā)現(xiàn)癌癥。血清生化和氧化抗氧化指標(biāo)顯示，五組之間的總膽固醇(T-CHO)、堿性磷酸酶(AKP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH

4、-PX)指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　血清代謝組學(xué)分析結(jié)果顯示，將同一時(shí)間段的臘腸組和陽性對(duì)照組中的代謝物與空白對(duì)照組相比，發(fā)現(xiàn)與能量代謝、氨基酸代謝、脂類代謝、核酸代謝等代謝有關(guān)的代謝產(chǎn)物發(fā)生了顯著改變，比如檸檬酸，N-甲基-DL-丙氨酸、脯氨酸、3-羥基-L-脯氨酸、L-半胱氨酸、3-氰基丙氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、5'-甲硫基腺苷(MAT)、棕櫚酸等含量增加，而5-甲氧基色胺（色氨酸代謝產(chǎn)物）、腐胺、甘氨酸、?；撬岬暮渴墙档偷?

5、β-丙氨酸、3-氨基異丁酸、乙醇胺這些和嘧啶相關(guān)的代謝產(chǎn)物也發(fā)生了改變。
　　結(jié)論:采用臘腸成功建立的大鼠損傷的模型以及NDMA建立了大鼠肝癌的模型，說明長期攝入NDMA超標(biāo)的臘腸會(huì)導(dǎo)致機(jī)體肝臟損傷;傳統(tǒng)的生化指標(biāo)不能理想的反映機(jī)體肝臟損傷的狀態(tài);對(duì)血清進(jìn)行代謝組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)與空白對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組和陽性對(duì)照組大鼠血清中與能量、氨基酸、脂肪酸等有關(guān)代謝過程發(fā)生了改變，并篩選出一些差異代謝物，可以作為可能的生物標(biāo)志物，為進(jìn)一步探索肝