Slc35d3對(duì)脂肪、肝臟、腎臟組織中脂代謝的影響.pdf

1、目的：肥胖是一種復(fù)雜的慢性疾病，也是21世紀(jì)代謝綜合征最重要的表現(xiàn)之一。肥胖與心血管疾病的危險(xiǎn)因素緊密相關(guān)，例如胰島素抵抗、糖尿病、高血壓和血脂異常等。肝臟是體內(nèi)最大的脂肪酸合成及代謝器官，合成的脂肪酸會(huì)在載脂蛋白的協(xié)助下釋放入血，在脂庫(kù)中儲(chǔ)存或?yàn)槠渌M織器官提供能量。脂肪組織是體內(nèi)最大儲(chǔ)能器官，多余的能量會(huì)以脂肪的形式儲(chǔ)存，當(dāng)能量不足時(shí)，發(fā)生脂肪動(dòng)員，來滿足機(jī)體所需。肝臟、心臟及腎臟等實(shí)質(zhì)性器官很容易發(fā)生脂肪變性，其中的脂代謝非常關(guān)鍵

2、。
　　SLC35D3基因編碼了一種核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道Slc35d3是肥胖或代謝綜合征的一個(gè)候選基因，其蛋白定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，與D1R相互作用。Slc35d3基因突變的小鼠會(huì)通過減弱紋狀體神經(jīng)元的多巴胺信號(hào)，從而導(dǎo)致代謝綜合征，而且在兩名代謝綜合征的患者中發(fā)現(xiàn)了SLC35D3基因的突變。本實(shí)驗(yàn)主要是通過研究SLC35D3基因在脂肪、肝臟及腎臟組織中對(duì)脂代謝的影響。
　　方法：采用熒光定量PCR的方法檢測(cè)16周齡的D

3、IO B6J（飲食誘導(dǎo)的肥胖）小鼠、ob/ob（leptin缺陷）小鼠及正常對(duì)照C57BL/6J小鼠的脂肪、肝臟、腎臟組織中Slc35d3mRNA轉(zhuǎn)錄水平是否變化;3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化6天后電轉(zhuǎn)染人源的SLC35D3基因，觀察其對(duì)分化指標(biāo)及脂代謝相關(guān)基因mRNA水平是否影響，同時(shí)檢測(cè)是否影響葡萄糖消耗情況;同時(shí)在HepG2細(xì)胞中利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法過表達(dá)SLC35D3基因，轉(zhuǎn)染兩天后檢測(cè)對(duì)脂代謝相關(guān)基因mRNA水平的影響;轉(zhuǎn)后第3

4、天用1000uM油酸、棕櫚酸共同刺激24h，檢測(cè)脂代謝相關(guān)基因mRNA水平的表達(dá)變化;刺激24h后恢復(fù)正常培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24h，并檢測(cè)對(duì)脂代謝相關(guān)基因mRNA水平的影響;在293T細(xì)胞中利用脂質(zhì)體的方法轉(zhuǎn)染人源SLC35D3基因，轉(zhuǎn)染2天后檢測(cè)其對(duì)脂代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平的改變。
　　結(jié)果：在DIO B6J小鼠、ob/ob肥胖小鼠模型中，脂肪及腎臟組織中Slc35d3的轉(zhuǎn)錄水平明顯低于C57BL/6J對(duì)照組(P＜0.01);在肥胖

5、小鼠的肝臟組織中，Slc35d3的轉(zhuǎn)錄水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。
　　3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化6天后過表達(dá)人源SLC35D3基因后，脂肪細(xì)胞分化指標(biāo)基因及脂代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)顯著降低，但是葡萄糖消耗差異不顯著。HepG2細(xì)胞過表達(dá)人源SLC35D3基因后，脂代謝相關(guān)基因的mRNA表達(dá)也顯著降低。293T細(xì)胞過表達(dá)人源SLC35D3基因后，脂代謝相關(guān)基因的mRNA表達(dá)也顯著降低。
　　結(jié)論：SLC35D3通過