ERCC1、TNF-α單核苷酸多態(tài)性與廣西壯族人群肝癌易感性的關系研究.pdf

1、目的:目前，在肝癌相關基因位點的單核苷酸多態(tài)性與肝癌易感性的關系研究中，DNA修復基因是一大研究熱點，切除修復交叉互補基因1(ERCC1)為核苷酸切除修復途徑中的關鍵基因之一，其基因中不同位點的單核苷酸多態(tài)性可能會影響到DNA切除修復的功能差異，導致包括腫瘤等各種惡性疾病的發(fā)生。在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，大多數(shù)患者伴隨著慢性炎癥，且炎癥慢性遷延影響腫瘤的病情。因此，炎癥中的細胞因子也是肝癌發(fā)生和發(fā)展的重要因素，在這些較熱門的細胞因子中，腫瘤

2、壞死因子-α(TNF-α)是其中之一。本次研究主要探討ERCC1-4533/-8092、TNF-α-238/-308共四個基因位點的單核苷酸多態(tài)性及全血ERCC1mRNA表達水平、血清TNF-α含量水平與廣西壯族人群肝癌易感性的關系及其臨床意義。
　　方法:采用1∶1病例對照的研究方法，其中肝癌組為80例新發(fā)未經(jīng)治療的原發(fā)性肝細胞癌患者，對照組為同期入院的，其年齡、性別與肝癌組匹配的非腫瘤疾病患者共80例。用聚合酶鏈反應-限制性片

3、段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）技術檢測ERCC1-4533/-8092、TNF-α-238/-308共四個位點的單核苷多態(tài)性，以實時定量熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)方法檢測外周血ERCC1 mRNA表達水平，運用雙抗體夾芯酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清TNF-α含量水平。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析使用SPSS17.0軟件。哈迪-溫伯格遺傳平衡(Hardy-Weinbergequilibrium)定律檢驗用于判斷對照組研究對象的基因

4、型分布是否具有群體代表性及可比性。獨立樣本T檢驗統(tǒng)計分析研究對象基本信息，方差分析方法統(tǒng)計分析單核苷酸多態(tài)性分型和等位基因在肝癌組和對照組之間的分布差異，秩和檢驗統(tǒng)計分析單核苷酸多態(tài)性分型與基因表達之間的關系，非條件性Logistic回歸方法統(tǒng)計分析校正性別、年齡、飲酒、吸煙、HBsAg陽性和血清AFP含量水平等混雜因素，計算相對危險度(OR)及其95％可信區(qū)間(95％CI)。當P＜0.05時，差別認為具有統(tǒng)計學意義。
　　結果:

5、
　　1.肝癌組ERCC1-4533和8092，TNF-α-238和308位點的基因分型分布頻率均符合采用哈迪-溫伯格遺傳平衡定律。
　　2.ERCC1的單核苷酸多態(tài)性及其基因表達水平與肝癌易感性的統(tǒng)計分析結果:ERCC1-4533位點的基因分型和等位基因頻率在肝癌組和對照組的頻數(shù)分布差異不具有統(tǒng)計學意義。而ERCC1-8092位點的基因分型在肝癌組和對照組的頻數(shù)分布差異具有統(tǒng)計學意義。ERCC1-4533位點的基因突變與肝

6、癌易感易感性無相關性(OR=1.574，95％CI:0.495-5.003)。與攜帶ERCC1-8092 CC基因型的個體相比，基因分型為ERCC1-C8092 CA/AA的個體的肝癌易感性更高(OR=3.255，95％CI:1.954-11.105)。ERCC1-8092位點的等位基因頻率亦在肝癌組和對照組的頻數(shù)分布差異具有統(tǒng)計學意義。
　　肝癌組的全血ERCC1 mRNA表達水平高于對照組，ERCC1的mRNA表達水平與基因分

7、型無關。
　　3.TNF-α的單核苷酸多態(tài)性及其基因表達與肝癌易感性的統(tǒng)計分析結果:TNF-α-238位點的基因分型和等位基因頻率在肝癌組和對照組的頻數(shù)分布差異不具有統(tǒng)計學意義。而TNF-α-308位點的基因分型在肝癌組和對照組的頻數(shù)分布具有統(tǒng)計學差異。TNF-α-238位點的基因突變與肝癌易感易感性無相關性(OR=0.831，95％CI:0.180-3.824)。與攜帶TNF-α-308 GG基因型的個體相比，攜帶TNF-α-3

8、08位點GA/AA基因型的個體具的肝癌易感性更高(OR=5.288，95％CI:1.287-21.734)。肝癌組中原發(fā)性肝細胞癌患者血清TNF-α水平顯著高于對照組，TNF-α-308 GA/AA基因分型的血清含量TNF-α水平較TNF-αGG基因分型高。
　　結論:原發(fā)性肝細胞癌患者的全血ERCC1mRNA和血清TNF-α含量水平高于正常對照組。ERCC1-8092、TNF-α-308位點單核苷酸多態(tài)性可能與廣西地區(qū)壯族人群原