九香蟲水提液對錳誘導SD大鼠生殖損傷的保護作用.pdf

1、目的：研究九香蟲水提液對生殖系統(tǒng)損傷的雄性大鼠生殖的保護作用。
　　方法：50只雄性SD大鼠(體重180-200g)，隨機分為空白對照組（Control）、模型組（Mn）和九香蟲低、中、高劑量干預(yù)組（即Asp50+Mn，Asp100+Mn, Asp200+Mn），10只/組。模型組和九香蟲干預(yù)組腹腔注射等容的30mg/kg的氯化錳溶液(MnCl2·4H2O)5d/w，1次/d，共2周；同時灌胃給予蒸餾水和相應(yīng)劑量的九香蟲水提液（5

2、0mg/kg,100mg/kg,200mg/kg），空白對照組給予生理鹽水（NS），7d/w，1次/d，共4周。觀察和檢測SD大鼠的生殖能力指標（大鼠精子數(shù)目、睪丸和附睪的臟器系數(shù)等），取各組雄性SD大鼠睪丸和血清做以下檢測：1.蘇木精-伊紅（HE）染色觀察睪丸結(jié)構(gòu)；2. Western blot和免疫組化法檢測睪丸凋亡相關(guān)蛋白和基因Bcl-2、Bax、P-p53、Cytochrome C(CytC)、Cleaved Caspase-3

3、(C-Cas3)的表達情況；3. WST-1法檢測大鼠血清和睪丸T-SOD活力；4.酶促法檢測大鼠血清和睪丸GSH-PX活力;5.化學比色法檢測大鼠血清和睪丸T-AOC活力；6.硫代巴比妥酸(TBA)法檢測大鼠血清和睪丸MDA含量。
　　結(jié)果：1、九香蟲水提液對錳損傷的精子數(shù)和睪丸及附睪臟器系數(shù)的影響：模型組精子數(shù)量、睪丸及附睪臟器系數(shù)均低于九香蟲干預(yù)組和空白組（P<0.05）；2、九香蟲水提液對錳損傷的睪丸組織形態(tài)的影響：九香蟲

4、水提液修復干預(yù)后，睪丸組織中生精上皮細胞增多，各級生精細胞排列有序，生精小管的管腔逐漸變小，基膜得以修復到完整，九香蟲高劑量組的形態(tài)結(jié)構(gòu)與空白對照組基本一致；3、九香蟲水提液對錳損傷的睪丸和血清的抗氧化酶系統(tǒng)的影響：模型組的睪丸組織和血清中T-SOD、T-AOC、GSH-PX活力均組低于空白對照組和九香蟲干預(yù)組（P<0.05），而模型組的MDA高于空白對照組和九香蟲干預(yù)組（P<0.05）；4、九香蟲水提液對錳損傷的Bcl-2表達的影響：

5、與模型組相比，對照組和各九香蟲干預(yù)組Bcl-2的免疫組化陽性著色和蛋白相對表達量均較模型組偏高（P<0.05），且隨九香蟲水提液劑量的增加而增強（P<0.05）；5、九香蟲水提液對錳損傷的睪丸凋亡相關(guān)蛋白BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas3表達的影響：與模型組相比，對照組和各九香蟲干預(yù)組BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas3的免疫組化陽性著色和蛋白相對表達量均較模型組偏低（P<0.05），并且隨著九香蟲水提液劑量的增加而減

6、弱（P<0.05）。
　　結(jié)論：1、九香蟲水提液對生殖系統(tǒng)損傷雄性大鼠的精子數(shù)和睪丸及附睪臟器有明顯改善；2、九香蟲水提液修復雄性SD大鼠生殖系統(tǒng)損傷的機制可能為：（1）通過增加雄性大鼠血清和睪丸抗氧化酶活性，減少其體內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài)，阻止生殖系統(tǒng)的脂質(zhì)過氧化而抑制生精細胞凋亡；（2）通過下調(diào)P-p53，抑制Bax表達，進而使Bcl-2表達增多，Bcl-2和Bax的異源二聚體增多，抑制生精細胞凋亡；同時，上調(diào)Bcl-2的表達抑制Cy