IgG糖基化修飾在SLE發(fā)病中的意義.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種以自身抗原暴露、多種自身抗體產(chǎn)生、補體系統(tǒng)的激活及免疫復(fù)合物沉積為主要環(huán)節(jié)的累及多系統(tǒng)的自身免疫性疾病。由于目前本病的致病原因不明確，近年來伴隨著糖組學(xué)的不斷發(fā)展，證實了免疫球蛋白糖基化修飾參與了自身免疫性疾病的發(fā)病及誘導(dǎo)免疫耐受。
　　目的:
　　探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清IgG-Fc段N糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與SLE發(fā)病的相關(guān)性。
　　

2、方法:
　　(1)收集50例SLE患者及26例健康孕婦(代表一定程度的免疫耐受狀態(tài))的空腹靜脈血，離心后取上清置于-80℃冰箱保存。10例混合人丙種球蛋白(正常人的血清)。收集所有SLE患者一般情況、臨床特征資料及實驗室檢查結(jié)果，并且根據(jù)SLE疾病活動性指標(SLEDAI-2000)對50例SLE患者進行臨床分期，評分≦4分為靜止期，評分≧5分為活動期。(2)利用ProteinG對血清中總免疫球蛋白進行分離純化，經(jīng)過SDS-PAG

3、E驗證后得到IgG，將純化得到的IgG用PNGase酶酶切，經(jīng)過進一步的富集與純化得到N-糖鏈，利用凝集素芯片能夠特異性地親和免疫球蛋白(IgG)表面糖鏈的特性，激光掃描檢測凝集素信號測定SLE（靜止期、活動期）,孕婦同IVIG的IgG表面糖鏈的結(jié)構(gòu)。(3)對比SLE(活動期,靜止期)與正常妊娠及IVIG的糖基化異常并且分析SLE活動期與靜止期患者血清糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與狼瘡疾病活動度及腎損傷實驗指標的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　

4、1.SLE患者血清中IgG-Fc段G2型半乳糖(15.92％±2.12%)、核心鹽藻糖(71.76%±1.83%），唾液酸含量(3.05%±0.63%)與IVIG(22.2%±1.3%)(80.43%±1.61%)(8.38%±0.93%)及正常妊娠者（32.81%±1.56%)(85.4%±1.82%)(9.06%±1.89%)的 IgG相比明顯降低(P＜0.05)， G0型半乳糖(23.29%±2.54%)及高甘露糖(13.75%±

5、2.27%)含量較IVIG(19.33%±3.35%)(11%±3.86%)及正常妊娠期婦女(14.65%±1.58%)(6.22%±0.77%)明顯增高(P＜0.05)， G1型半乳糖在SLE(46.98%±2.94%),IVIG(48.48%±4.66%),正常妊娠期婦女(46.33%±2.26%)差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.在SLE活動期患者其血清IgG表面G2型半乳糖(15.42%±3.78%)、唾液酸

6、(2.86%±0.62%)含量較SLE靜止期(17.86%±0.94%)(3.37%±0.52%)患者明顯降低(P＜0.05)，而 G0型半乳糖(24.57%±2.21%)及高甘露糖(15.28%±1.05%)含量較SLE靜止期(21.01%±1.08%)(11.04%±0.79%)明顯升高(P＜0.05),SLE活動期的核心鹽藻糖(71.7%±1.20%)水平與靜止期(71.6%±1.55%)無明顯差異(P＞0.05)。SLE患者體內(nèi)

7、IgG表面G0型半乳糖含量與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.704 P＜0.000)，G2型半乳含量與SLEDAI評分呈負性相關(guān)(r=-0.792 P＜0.000)，高甘露糖含量與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.731 P＜0.000)，唾液酸與SLEDAI評分無明顯相關(guān)性(r=0.004 P＞0.05)。
　　3.SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.504 P＜0.000)、高甘露糖(r=0.571 P＜0.000)

8、與ds-DNA抗體呈正相關(guān)，G2型半乳糖與ds-DNA抗體呈負相關(guān)(r=-0.572 P＜0.000).SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.485 P＜0.000)、高甘露糖(r=0.754 P＜0.000)與24h尿白蛋白呈正相關(guān)，G2型半乳糖與24h尿白蛋白呈負相關(guān)(r=-0.513 P＜0.000)。SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.417 P＜0.05)、高甘露糖(r=0.460 P＜0.05)與β2-微球蛋白

9、呈正相關(guān)，G2型半乳糖與β2-微球蛋白呈負相關(guān)(r=-0.422 P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.SLE患者與正常妊娠期婦女及IVIG相比體內(nèi)IgG表面存在異常的糖基化修飾，提示IgG表面糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與SLE發(fā)病有關(guān)。
　　2.與SLE穩(wěn)定期的患者相比活動期的SLE患者IgG表面糖基化存在明顯差異，提示IgG表面異常的糖基化修飾與SLE疾病活動性有關(guān)。SLE患者血清IgG表面糖鏈的含量與SLEDAI、C3、C4