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文檔簡介
1、近年來,大量的研究表明唐古特白刺果(NitrariatangutorumBobr.NTB)多糖及黑果枸杞(LyciumruthenicumMurr.LRM)多糖具有多種生理功能。但其對(duì)T/NK細(xì)胞免疫功能的影響尚不清楚。本研究以唐古特白刺果及黑果枸杞為主要原料,采用超聲-微波協(xié)同提取方法提取了多糖,研究了該兩種多糖對(duì)小鼠IFN-γ及T/NK細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的作用。
方法:
?。?)采用超聲-微波協(xié)同提取的辦法提取了唐古特白
2、刺果及黑果枸杞多糖含量分別為47.78%和35.90%。
?。?)動(dòng)物分組:昆明種小鼠40只,雌雄各半;隨機(jī)分為4組,每組10只,組別為:正常對(duì)照組、模型組、模型+NTB多糖組和模型+LRM多糖組。
?。?)免疫受抑模型建立;免疫受抑組腹腔注射環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CPM)70mg/kg連續(xù)5天造模。
(4)NTB多糖及LRM多糖注射:免疫受抑組造模成功后腹腔注射NTB及LRM多糖3.6g
3、/kg[13]連續(xù)10天。正常對(duì)照組腹腔注射同等量生理鹽水。末次給藥24h后斷頸采血,稱取脾臟和胸腺重量,取外周血測定CD3、CD4、CD8、NK(CD49b)及血清IFN-γ的測定。
?。?)小鼠免疫功能的檢測:
a.脾臟、胸腺重量(指數(shù))及脾臟組織結(jié)構(gòu)觀察;
b. RT-PCR檢測小鼠脾細(xì)胞IFN-γmRNA數(shù)值;
c.ELISA法檢測小鼠血清IFN-γ的含量;
d.流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠
4、外周血中細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8及NK細(xì)胞百分比
結(jié)果:
模型組與模型+NTB多糖組及模型+LRM組脾臟、胸腺重量增加,模型組淋巴濾泡消失,NTB多糖及LRM多糖組淋巴濾泡趨于正常,血清中IFN-γ的含量顯著增加(P<0.05),IFN-γ的表達(dá)亦增強(qiáng)(P<0.05);流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的顯示CD3、CD4、CD8、NK細(xì)胞均有不同程度的增加,其顯著性分別為(P<0.05)、(P<0.01)、(
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