溫陽活血解毒復方對HUVEC功能和VEGFs-VEGFRs信號通路的影響及臨床研究.pdf

1、目的:
　　動脈粥樣硬化易損斑塊形成是心血管疾病的重要基礎之一，其導致的急性冠脈綜合征等急危重癥長久以來一直是頭號健康殺手。近年研究發(fā)現(xiàn)，病理性血管新生過程及其調(diào)控因子與慢性炎癥、動脈硬化等眾多病理生理過程和（或）慢性疾病均有較密切的關(guān)系，并初步證實其與斑塊易損性的相關(guān)性。因此將斑塊內(nèi)血管新生作為標靶進行干預、影響斑塊的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸，可能是今后防治相關(guān)疾病的研究方向之一。ACS在傳統(tǒng)中醫(yī)學中可歸屬于心痛病，其防治的理論體系與實踐經(jīng)驗

2、亦歷經(jīng)數(shù)千年錘煉，有不少獨到之處值得深入挖掘與解析:如近年來結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學的炎癥學說及中醫(yī)病因病機特點總結(jié)提出的溫陽活血解毒法即是一例。故本研究從干預斑塊內(nèi)血管新生角度出發(fā)，探討溫陽活血解毒復方穩(wěn)定易損斑塊的可能作用機理，同時結(jié)合臨床觀察評價溫陽活血解毒法的應用效果，以期豐富中醫(yī)藥防治心血管急癥的理論，擴展防治斑塊的療法。
　　方法:
　　本研究分為實驗研究與臨床觀察兩部分。實驗部分，采用藥物血清干預離體培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞

3、(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)，通過細胞實驗及分子檢測觀察其效果。細胞培養(yǎng)使用高糖型DMEM+FBS(DMEM∶ FBS=8∶2)常規(guī)培養(yǎng)，取4代至7代的細胞備用。藥物巾清采白SD大鼠，用溫陽活血解毒復方低、中、高劑量及生理鹽水每12小時灌胃1次(8a.m.～8p.m.)。在灌胃72小時（3天）、120小時（5天）后，提取末次給藥1h后、2h后的藥物血清，以之干預細胞。分別用細

4、胞毒性檢測（CCK-8）、bFGF細胞管形成試驗、transwell裝置觀察藥物血清對HUVEC增殖、分化、運動能力的影響。用Western Blot檢測血清干預后細胞VEGFR-1、-2及下游信號分子的表達情況，觀察其對血管新生相關(guān)主要信號分子的影響。
　　臨床觀察部分，參照相關(guān)診斷標準納入30例不穩(wěn)定心絞痛患者，隨機分入西藥組與綜合組（各15例）。西藥組按照治療規(guī)范給予常規(guī)各項治療，綜合組在其基礎上加用在組方上體現(xiàn)溫陽活血解毒

5、法的麝香保心丸與通塞脈片。對比治療前后的西雅圖生存評分、中醫(yī)癥候評分，評價溫陽活血解毒法對不穩(wěn)定心絞痛的療效及患者生存質(zhì)量的影響。
　　成果:
　　體外實驗結(jié)果表明，溫陽活血解毒復方藥物血清對HUVEC有明顯的抑制作用(p＜0.01);能有效抑制細胞分化能力(p＜0.01)、減弱運動能力(p＜0.05)，抑制程度均與藥物血清濃度呈正相關(guān)。在對相關(guān)分子的影響方面，各組的VEGFR-1表達量無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)，亦無特異

6、性趨勢;但VEGFR-2的表達量與藥物血清濃度呈負相關(guān)(p＜0.05)，其下游信號分子的下調(diào)更明顯，趨勢與VEGFR-2的表達情況一致。
　　臨床觀察表明，西藥組與綜合組均可改善不穩(wěn)定心絞痛患者的生存質(zhì)量，兩組間總體療效比較，治療組的臨床療效有優(yōu)于對照組的趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。各量表積分方面，綜合組較同期西藥組的積分下降更明顯(p＜0.01)，說明加用體現(xiàn)溫陽活血解毒法的中成藥后能更好地改善不穩(wěn)定心絞痛患者的癥

7、狀，提升短期生存質(zhì)量。
　　結(jié)論:
　　溫陽活血解毒復方藥物血清可通過直接下調(diào)血管新生相關(guān)功能型分子、信號通路的表達有效地抑制HUVEC的分化、運動、增殖能力，從而達到抑制血管新生的效果，這可能為其穩(wěn)定易損斑塊的內(nèi)在機制之一。在常規(guī)診療方案上加用溫陽活血解毒類中成藥可更好地改善不穩(wěn)定心絞痛患者的癥狀，說明溫陽活血解毒法的確可提高不穩(wěn)定心絞痛的療效?？傮w而言，溫陽活血解毒法可作為有效治療動脈粥樣硬化斑塊的基本方法使用，可為豐富