化濁解毒活血通絡(luò)法對大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)細胞凋亡及P38MAPK信號通路的影響.pdf

1、目的：在大鼠腦缺血再灌注損傷模型的基礎(chǔ)上，運用化濁解毒活血通絡(luò)方進行干預(yù)，通過對神經(jīng)功能缺損評分、腦組織病理形態(tài)改變、用藥后腦梗死體積變化、P-P38MAPK與 Caspase-3的觀察，探討該方法是否通過抑制 P38MAPK信號通路來調(diào)控細胞凋亡，進一步闡明化濁解毒活血通絡(luò)法對受損神經(jīng)元產(chǎn)生保護作用的內(nèi)在機制。
　　方法：健康雄性SD大鼠54只，隨機分為6組：分別是假手術(shù)組、模型組、化濁解毒活血通絡(luò)方低劑量組（以下簡稱“中藥低劑

2、量組”）、化濁解毒活血通絡(luò)方中劑量組（以下簡稱“中藥中劑量組”）、化濁解毒活血通絡(luò)方高劑量組（以下簡稱“中藥高劑量組”）和阿司匹林組。采用改良線栓法制備腦缺血再灌注損傷模型，于造模后第2天給予相應(yīng)藥物治療，假手術(shù)組和模型組給予等量生理鹽水灌胃，中藥各劑量組灌服相應(yīng)濃度的化濁解毒活血通絡(luò)方中藥液，阿司匹林組給予阿司匹林混懸液灌胃。連續(xù)灌胃14d后對各組大鼠進行神經(jīng)功能缺損評分，處死后斷頭，每組選取3只大鼠取腦，進行TTC染色，測量梗死范圍

3、。其余6只取右側(cè)大腦半球分別進行HE染色，光鏡下觀察缺血區(qū)大腦皮質(zhì)組織的形態(tài)變化。PCR法分別檢測腦皮質(zhì)區(qū)P-P38MAPK和Caspase-3 mRNA的表達。
　　結(jié)果：⑴神經(jīng)功能缺損評分：與假手術(shù)組比較，模型組神經(jīng)功能缺損評分明顯升高（P＜0.05）；與模型組相比，中藥低劑量組、中藥中劑量組神經(jīng)功能缺損無明顯差異（P＞0.05），中藥高劑量組、阿司匹林組神經(jīng)功能缺損評分均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與中藥低劑量組

4、比較，中藥中、高劑量組神經(jīng)功能缺損評分均下降（P＜0.05）；但中藥高劑量組與阿司匹林組相比，無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。⑵腦組織病理形態(tài)學(xué)改變：假手術(shù)組大鼠大腦皮層區(qū)腦組織結(jié)構(gòu)正常，細胞排列整齊緊密，無變性壞死細胞；模型組大鼠大腦皮層區(qū)可見明顯缺血區(qū)，腦組織明顯水腫，神經(jīng)組織排列紊亂，細胞間隙明顯增大，可見大量的細胞變性壞死；中藥低劑量組腦組織形態(tài)表現(xiàn)與模型組相似；中藥中劑量組、中藥高劑量組及阿司匹林組缺血區(qū)變性壞死細胞較模型組

5、減少；中藥高劑量組及阿司匹林組可見少量神經(jīng)壞死細胞，腦組織形態(tài)無明顯差異。⑶TTC法檢測大鼠腦梗死體積：與假手術(shù)組相比，各組均存在較明顯的梗死灶，其中模型組與中藥低劑量組梗死體積無明顯差異（P＞0.05）;中藥中、高劑量組及阿司匹林組梗死體積與模型組相比，均有所減?。≒＜0.05）；中藥中、低劑量組腦梗死體積減少均則不及阿司匹林組（P＜0.05），中藥高劑量組與阿司匹林組相比腦梗死體積無明顯變化（ P＞0.05）。⑷PCR法檢測腦組織中

6、Caspase-3的表達：與假手術(shù)組相比，模型組Caspase-3的表達水平明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，各用藥組Caspase-3的表達水平均降低（P＜0.05）；與中藥低劑量組比較，中藥中劑量、中藥高劑量組及阿司匹林組Caspase-3的表達降低顯著（P＜0.05）；且中藥中、高劑量組與阿司匹林組比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。⑸PCR法檢測腦組織中P-P38MAPK的表達：與假手術(shù)組比較，模型組P-P38MAPK的

7、表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，各用藥組P-P38MAPK的表達水平均降低（P＜0.05）；與中藥低劑量組比較，中藥高劑量組及阿司匹林組P-P38MAPK的表達顯著降低（P＜0.05）；而中藥高劑量組的表達與阿司匹林組相當(dāng)，無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：①化濁解毒活血通絡(luò)方能明顯改善腦缺血再灌注損傷大鼠受損腦組織的病理形態(tài)，降低該模型大鼠神經(jīng)功能缺損評分。②化濁解毒活血通絡(luò)方能夠減小腦