PPARα激動(dòng)劑Fenofibrate對(duì)皮膚放射防護(hù)的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：放射性皮膚損傷是腫瘤放射治療、放射性核事故以及骨髓移植預(yù)處理之后常見的并發(fā)癥；長(zhǎng)期以來這一疾病機(jī)理不明，也缺乏有效的防治手段。過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）屬于核受體蛋白，激活后入核參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。PPARα在細(xì)胞分化、發(fā)育以及新陳代謝（糖、脂、蛋白質(zhì)）和炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激中起關(guān)鍵性的作用。PPARα激活后能調(diào)控多種抗氧化蛋白的表達(dá)。非諾貝特（Fenofibrate）是PPARα激動(dòng)劑家族的一員，它能激活PPARα

2、，并且增加FAPB4的表達(dá)，后者不僅是一種脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，也是而且是一種抗氧化劑。因而我們?cè)O(shè)想Fenofibrate是否能使輻射損傷的皮膚細(xì)胞通過增加抗氧化蛋白的表達(dá)清除電離輻射帶來的活性氧自由基（ROS），從而減輕電離輻射對(duì)皮膚的損傷。
　　方法：采用免疫熒光以及熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)了不同濃度Fenofibrate預(yù)處理皮膚細(xì)胞后PPARα的表達(dá)及活化情況。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)皮膚細(xì)胞的凋亡、western-blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋

3、白；采用活性氧探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS；檢測(cè)FABP4過表達(dá)腺病毒感染皮膚細(xì)胞及Fenofibrate聯(lián)合FABP4抑制劑預(yù)處理后因電離輻射引起細(xì)胞內(nèi)ROS水平變化。用直線加速器產(chǎn)生的45 Gy電子線照射SD大鼠臀部皮膚建立放射性皮膚損傷模型，皮下分別注射PBS或Fenofibrate后，檢測(cè)組織內(nèi)ROS和MDA的變化，并采用半定量方法對(duì)皮膚損傷評(píng)分，HE染色觀察組織結(jié)構(gòu)的變化；80 Gy電子線照射巴馬香豬肋部皮膚建立放射性皮膚損傷模型，皮

4、下分別注射PBS或Fenofibrate，經(jīng)21 d后HE染色觀察組織結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：皮膚HaCaT和WS1細(xì)胞經(jīng)Fenofibrate預(yù)處理后，PPARα在細(xì)胞核內(nèi)聚集、顯著增加PPRE報(bào)告基因的水平。皮膚細(xì)胞經(jīng)20 Gy X線照射48和72 h后，F(xiàn)enofibrate預(yù)處理組的細(xì)胞凋亡顯著降低，凋亡抑制蛋白 Bcl-2表達(dá)增高。Fenofibrate預(yù)處理組較對(duì)照組皮膚細(xì)胞經(jīng)20 Gy X線照射后細(xì)胞內(nèi)活性氧含量顯著降

5、低。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明Fenofibrate組能顯著減輕大鼠和巴馬香豬皮膚受照射后損傷程度；此外皮膚組織愈合后Fenofibrate組大鼠皮膚表皮層和真皮層的增生程度也較對(duì)照組明顯減輕。我們進(jìn)一步通過Western blot發(fā)現(xiàn)Fenofibrate能增加脂質(zhì)結(jié)合蛋白FAPB4的表達(dá)。后者能夠參與氧化應(yīng)激，部分清除電離輻射引起氧自由基，減輕電離輻射對(duì)皮膚組織的損害。
　　結(jié)論： Fenofibrate能有效減少皮膚細(xì)胞電離輻射后的自由基