NCX1通道和自噬在高脂血癥急性胰腺炎中的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討NCX1通道蛋白及基因、自噬相關(guān)蛋白及基因、凋亡通路相關(guān)蛋白及基因在高脂血癥急性胰腺炎中的相關(guān)性;為高脂血癥急性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制及病理過程研究補(bǔ)充新的線索。
　　方法：40只健康的清潔級 SD成年雄鼠，按照電腦產(chǎn)生的隨機(jī)數(shù)將其分為4個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)組，N=10只，即：急性高脂血癥胰腺炎組（A組，N=10），非高脂血癥急性胰腺炎組（B組，N=10），高脂血癥非急性胰腺炎組（C組，N=10）以及空白對照組（D組，N=10）。用新

2、鮮配制的10％ Tyloxapol溶液誘導(dǎo)大鼠高脂血癥模型，高脂血癥模型創(chuàng)建12小時(shí)后,再用3.5%牛黃膽酸鈉溶液逆行胰膽管注射誘導(dǎo)大鼠急性胰腺炎模型，待兩種模型都建立后12小時(shí)，抽取血液標(biāo)本用于血清學(xué)檢驗(yàn)，切取胰腺組織標(biāo)本用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。血液標(biāo)本用于檢測甘油三酯(TG)、膽固醇（TC），血淀粉酶（AMY），血脂肪酶（LPS）。組織標(biāo)本一部分用H&E染色后進(jìn)行病理學(xué)評分，用于評估組織損傷；另一部分組織用于檢測NCX1、LC3II、Becl

3、in-1、Caspase-3以及Caspase-9蛋白量變化，通過 western-blot技術(shù)；再取部分組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)(q RT-PCR)檢測 NCX1、LC3II、Beclin-1、Caspase-3以及 Caspase-9等指標(biāo)mRNA的相對表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①A組、C組TG、TC較 B組、D組顯著升高（P<0.05）；A組與C組TG、TC水平?jīng)]有明顯變化；B組與D組TG、TC水平基本一致②A組、B組

4、AMY、LPS水平顯著高于C組、D組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；A組AMY水平與B組相比，顯著升高（P<0.05）；A組與B組LPS水平?jīng)]有明顯差異；C組與D組AMY、LPS水平基本相同。③B組胰腺組織較C組、D組病理組織學(xué)評分更高（P<0.05）；比較A組和B組病理組織學(xué)評分，A組明顯升高（P<0.05）；C組與D組胰腺組織病理學(xué)評分沒有明顯差異。④ B組 NCX1、LC3II、Beclin-1、Caspase-3以及Cas

5、pase-9蛋白及mRNA的相對表達(dá)量經(jīng)GADPH校正與C組、D組進(jìn)行組間比較，B組的相對表達(dá)量明顯高于其他兩組（P<0.05）；A組LC3II、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9蛋白及mRNA表達(dá)量與B組、C組、D組之間進(jìn)行兩兩比較，A組表達(dá)量最高（P<0.05）；A組NCX1蛋白及mRNA表達(dá)較C組、D組顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P<0.05），但與B組相比，沒有明顯上調(diào)；C組NCX1、LC3II、Be

6、clin-1、Caspase-3以及Caspase-9與D組相比，蛋白及mRNA表達(dá)量基本相同。
　　結(jié)論：非高脂血癥急性胰腺炎的鈣超載有NCX1參與，而對于高脂血癥急性胰腺炎而言，NCX1通道并非是起決定性作用的鈣離子通道；LC3II、Beclin-1蛋白及基因表達(dá)在非高脂血癥急性胰腺炎組織顯著增高，其在高脂血癥急性胰腺炎組織中表達(dá)顯著高于非高脂血癥急性胰腺炎，說明自噬與高脂血癥急性胰腺炎密切相關(guān)。高脂血癥急性胰腺炎Caspas