大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞對不育大鼠生殖系統(tǒng)修復(fù)作用的研究.pdf

1、現(xiàn)代社會的發(fā)展為人們的生活提供了豐富的物質(zhì)保證，但同時人類生殖健康卻因環(huán)境改變、生活節(jié)奏加快和壓力增大而不斷惡化。其中由于男性因素造成的不孕不育呈明顯的上升趨勢，少精、弱精和無精癥是男性不育的主要原因。要從根本上治療男性不育癥，干細胞是理想的種子細胞，干細胞移植是解決這一難題的根本方法。
　　 胚胎干細胞具有分化為精原干細胞的能力，但由于其來源有限、移植于體內(nèi)的成瘤性、免疫排斥性以及社會倫理道德的制約等限制了其在臨床中的應(yīng)用，骨

2、髓間充質(zhì)干細胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)是存在于骨髓中一種非造血組織的間充質(zhì)干細胞，其儲量豐富、取材方便、避免了異體免疫排斥反應(yīng)，在特定誘導(dǎo)條件下可以向三胚層細胞分化，而骨髓間充質(zhì)干細胞是否能夠分化為雄性生殖細胞，目前少見研究報道。為此，本研究比較了60mg/kg、40mg/kg、30mg/kg、20mg/kg、15mg/kg不同劑量白消安、單次和連續(xù)多次注射白消安制備大鼠無精癥模型的效

3、果。檢測了注射后不同時間大鼠睪丸重量、睪丸組織細胞結(jié)構(gòu)、精子密度、活力、畸形率等。同時體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，免疫組化檢測骨髓間充質(zhì)干細胞表面抗原CD44和CD106、生殖細胞表面抗原c-kit基因的表達，將培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞移植到無精癥大鼠睪丸曲細精管中，移植后30d檢測睪丸組織細胞結(jié)構(gòu)、免疫組化檢測了CD106、CD44、c-kit基因在睪丸組織細胞中的表達。結(jié)果表明：單次注射白消安各組大鼠10d內(nèi)全部死亡。連續(xù)10d腹腔

4、注射白消安累計劑量為20mg/kg(體重)組大鼠全部存活，注射后睪丸形態(tài)變小、重量減輕，到30d時重量僅為0.49g，對照組為0.97g，二者間有明顯差別。注射白消安30d后睪丸組織中曲細精管內(nèi)壁僅有1-2層支持細胞，管腔中央少見細胞，對照組睪丸曲細精管管腔中可見大量的生殖細胞，二者間有顯著差別。從大鼠股骨腔成功分離培養(yǎng)了骨髓間充質(zhì)干細胞，免疫組化結(jié)果顯示CD44表達陽性、CD106表達陽性、c-kit表達陰性。將大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞注