2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、IFT139是萊茵衣藻纖毛內(nèi)運輸?shù)鞍譏FT復(fù)合物A中的一個重要組份。ift139在大腸桿菌中的表達、蛋白純化及多克隆抗體的制備,對于今后研究IFT139在纖毛中的特殊作用及IFT139與其他運動相關(guān)蛋白的相互作用奠定了重要基礎(chǔ),也對于纖毛病進一步的研究進展提供了有利的依據(jù)。
  本實驗(1)以pBlu-ift139質(zhì)粒為模板,通過PCR方法獲得兩端帶有相應(yīng)酶切位點的ifi139目的片段,并成功構(gòu)建pGEX-2T-ifi139、pM

2、AL-c2-ift139與pET-28a(+)-ift139三個重組質(zhì)粒。(2)將三種重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到BL21,進行IPTG(濃度為0.2 mmol/L)的誘導(dǎo)表達,GST-139、MBP-139及HIS-139三種融合蛋白在誘導(dǎo)后均有所表達,帶有MBP標(biāo)簽的蛋白表達大部分分布于上清,GST標(biāo)簽的融合蛋白在上清和沉淀中均有分布,但表達量較低,HIS標(biāo)簽的融合蛋白均以沉淀的形式存在,最后選擇經(jīng)過親和層析純化后的MBP-IFT139融合蛋白作

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