黃曲霉A5p1脫色類黑精及其機理初探.pdf

1、糖蜜酒精廢水是一種難降解的有色污染物,利用微生物對其進行脫色是可行方法之一,本課題組曾經(jīng)篩選到一株黃曲霉A5p1可有效脫色廢水。為進一步弄清楚其脫色機理,本文以糖蜜酒精廢水的主要色素成分—類黑精為對象,探討菌株黃曲霉A5p1的脫色機制,以便更好地提高脫色效率。
　　首先對黃曲霉A5p1脫色類黑精進程中的培養(yǎng)條件進行確定,分別考察了外加碳源、碳源濃度、外加氮源、氮源濃度以及初始pH對脫色的影響,實驗結(jié)果表明:選用蔗糖作為碳源、NaN

2、O3作為氮源,濃度分別為2.5％和0.2%(w/v),初始pH為6.0的培養(yǎng)基條件下,A5p1對20%的類黑精的脫色率在第8天達到最大的65%。在脫色前期脫色率與細胞干重呈正比,pH維持在5.0~6.0之間。
　　開展菌株黃曲霉A5p1的脫色機理研究,利用滅活菌體對類黑精進行脫色以探討生物吸附作用,通過提取胞內(nèi)、胞外粗酶液研究生物降解作用,判定是否存在Lac、MnP和MIP等胞外酶酶系。實驗結(jié)果表明,A5p1滅活菌對類黑精的吸附脫

3、色可達24.5%,占總脫色率的1/3。生物降解主要以胞內(nèi)酶為主要脫色酶系;胞外酶中Lac、MnP和MIP均可以檢測到酶活力,雖與脫色率沒有明顯趨勢關(guān)系但其作用不可排除。過氧化氫產(chǎn)率與脫色率變化趨勢一致,推測過氧化氫的氧化作用是主要的脫色機理之一。
　　最后在上述實驗基礎(chǔ)上,研究產(chǎn)過氧化氫酶之一的葡萄糖氧化酶在脫色進程中的作用,通過添加激活劑NaCl、抑制劑NaHSO3和酶催化產(chǎn)物葡萄糖酸驗證葡萄糖氧化酶的作用大小。實驗結(jié)果顯示,無

4、論在有無外加刺激物的條件下,葡萄糖氧化酶均與過氧化氫產(chǎn)率及脫色率的變化趨勢一致,說明葡萄糖氧化酶是A5p1產(chǎn)過氧化氫的酶系之一,也是主要的脫色酶之一;但因為三者之間變化程度的不同,推測可能含有其他的產(chǎn)過氧化氫酶系作用。而在馬丁培養(yǎng)基中培養(yǎng)的A5p1未檢測到葡萄糖氧化酶活力,初步推測可能是因為GOD是由類黑精誘導(dǎo)產(chǎn)生的。根據(jù)類黑精機理探討得出的結(jié)論,探討了糖蜜酒精廢水中是否存在葡萄糖氧化酶及相應(yīng)的脫色作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn),糖蜜酒精廢水脫色體系中