桑葚花色苷的提取及對人乳腺癌細胞株mda-mb-453生長的抑制

1、桑葚花色苷的提取及對人乳腺癌細胞株MDAMB453生長的抑制王湛1，付鈺潔12，?；?，趙長君1，糜漫天1（400038重慶，重慶第三軍醫(yī)大學：營養(yǎng)與食品安全研究中心，重慶市營養(yǎng)與食品安全重點實驗室1；400050重慶，重慶理工大學：藥學與生物工程學院2）摘要：目的目的以超聲輔助乙醇浸提法提取桑葚花色苷，并觀察其對人乳腺癌細胞株MDAMB453體內(nèi)外生長的抑制作用。方法方法將桑葚冷凍干燥，冷凍干粉于常溫下用70%濃度的乙醇以1﹕15的料

2、液比超聲提取1h，提取液采用Amberlite?XAD7HP型大孔吸附樹脂以1mlmin的吸附流速和1mlmin的洗脫流速在pH3.0酸性環(huán)境下純化，得到桑葚花色苷提取物。利用CCK8法檢測桑葚花色苷提取物對人乳腺癌細胞MDAMB453增殖活力的影響；以24只雌性BALBc裸鼠建立MDAMB453細胞移植瘤模型，隨機分為對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組4組，分別以0、50、100、200mgkgd的桑葚花色苷提取物膳食干預，檢測其對

3、腫瘤生長的影響。結(jié)果結(jié)果獲得花色苷平均含量為41.8%的桑葚花色苷提取物；CCK8法檢測結(jié)果表明，桑葚花色苷提取物可顯著降低乳腺癌細胞活力，并顯示劑量效應關(guān)系；體內(nèi)試驗結(jié)果表明，高劑量組和中劑量組移植瘤體積和質(zhì)量均顯著低于對照組，表明桑葚花色苷提取物膳食干預可有效抑制移植瘤的生長。結(jié)論結(jié)論桑葚花色苷提取物能夠顯著抑制人乳腺癌細胞株MDAMB453的生長。關(guān)鍵詞：桑葚花色苷；乳腺癌；移植瘤；MDAMB453Effectsofanthocy

4、aninextractofmulberryfruitonthegrowthoftransplantedtumofbreastcancerMDAMB453cellsWangZhan1，F(xiàn)uyujie12，ChangHui1ZhaoChangjun1MiMantian1(DepartmentofNutritionFoodHygieneCollegeofPreventiveMedicineThirdMilitaryUniversityChon

5、gqingKeyLabatyofNutritionFoodSafetyChongqing400038China1；SchoolofPharmacyBioengineeringChongqingUniversityofTechnologyChongqing400050China2)Abstract:ObjectiveStudyontheextractionofanthocyanincompoundsinmulberryfruitobser

6、veitseffectsonthegrowthofbreastcancerMDAMB453cellsinvitroinvivo.MethodsDrypowderofmulberryfruitafterfreezedehydrationwasdiffusedby70%ethanolwithsonicationthematerialliquidratiowas1﹕15.TheextractingsolutionwaspurifiedbyAm

7、berlite?XAD7HPresininpH3.0acidenvironmenttheabsptionflowratewas1mlmintheelutionflowratewas1mlmin.CellsviabilitywasdetectedbyCCK8assay.24femaleBALBcnudemicewereinjectedwithMDAMB453cellstoestablishtransplantedtummodels.The

8、micewereequallyromizedinto4groupsincludingcontrolgrouplowdosedledosehighdosetreatmentgroups.aladministrationofmulberryfruitanthocyaninextract(050100200mgkgdayrespectively)wasgiventothemicebearingcancercellxenografts.Tumv

9、olumesweremeasuredeveryfourdays.ResultsTheaveragecontentofanthocyanincompoundsofmulberryfruitanthocyaninextractwas41.8%.CCK8assayindicatedmulberryfruitanthocyaninextractreducedbreastcellsviabilitymarkedly.Tumsinhighdoseg

10、roupdledosegroupweresignificantlysmallerslighterthanthecontrol.Thegrowthoftransplantedtumsintreatmentgroupsweresuppressed.ConclusionThemulberryfruitanthocyaninextractcouldsignificantlysuppressthegrowthofhuman基金項目：國家自然科學基

11、金資助項目（No.30901194）SupptedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(30901194）作者簡介：王湛（1986），女，重慶市人，漢族，在讀碩士，助教，主要從事天然植物化合物的生物活性研究。電話（023）68752291，Email：cindy_12345@通訊作者：糜漫天，電話（023）68752292；Email:mimt2007@共處理28天取材。1.2.4腫瘤

12、體積檢測：使用游標卡尺測量腫瘤的最長徑(a)和最短徑(b)，按公式求出腫瘤體積V＝ab2。1.3統(tǒng)計統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)均以平均值標準方差（s）表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，x兩組間差異比較采用t檢驗，P值0.05認為具有顯著性差異。2結(jié)果2.1獲得花色苷平均含量得花色苷平均含量為41.8%的桑葚花色苷提取物的桑葚花色苷提取物經(jīng)過超聲波輔助乙醇浸提法得到桑葚花色苷粗提物，再經(jīng)過樹脂吸附、洗脫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和冷凍干燥，得

13、到純化的桑葚花色苷提取物。利用pH示差法測定桑葚花色苷提取物中花色苷的總含量為41.84.8%。2.2桑葚花色苷提取物桑葚花色苷提取物對乳腺癌乳腺癌細胞活力的影響胞活力的影響CCK8法細胞活力檢測結(jié)果表明，相對于對照組，桑葚花色苷提取物作用各組吸光值下降，且隨作用劑量增加下降程度增加，100mgml以上劑量作用組與對照組相比出現(xiàn)顯著性差異（見表1），這表明，桑葚花色苷提取物可顯著降低乳腺癌MDAMB453細胞增殖活力，并呈現(xiàn)劑量效應關(guān)系

14、，見圖1。表1.CCK8法細胞活力檢測結(jié)果桑葚花色苷提取物處理組（mgml）空白對照組50100150200吸光值0.0050.0030.5840.1210.4970.0440.4100.034a0.3910.034a0.3250.037baP0.05bP0.01與對照組比較抑制率(%)baa010203040506050mgml100mgml150mgml200mgml增殖抑制率（%）aP0.05bP0.01與對照組比較圖1.桑葚花色