豬源和人源2009-H1N1流感病毒毒力比較研究.pdf

1、第1株2009/H1N1大流行流感病毒在2009年4月被分離出來后，關(guān)于2009/H1N1流感病毒由人向豬傳播的報(bào)道越來越多。在豬流感流行病學(xué)調(diào)查中，本實(shí)驗(yàn)室從豬群中分離到4株2009/H1N1流感病毒。為了進(jìn)一步研究這些病毒對(duì)哺乳動(dòng)物的致病性，我們分別評(píng)價(jià)了從豬體內(nèi)分離到的2009/H1N1流感病毒(p-H1N1)、從人體內(nèi)分離到的2009/H1N1流感病毒(h-H1N1)對(duì)小鼠模型的致病性。結(jié)果顯示，兩株p-H1N1病毒A/swin

2、e/Nanchang/3/2010和A/swine/Nanchang/F9/2010(H1N1)在小鼠肺臟中復(fù)制能力更強(qiáng)，有兩株病毒甚至能導(dǎo)致小鼠大量死亡。組織病理學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，感染p-H1N1的小鼠肺臟出現(xiàn)不同程度的病理損傷，有中度甚至嚴(yán)重的細(xì)支氣管炎，偶爾伴隨有細(xì)支氣管上皮組織細(xì)胞的壞死，并有輕微的肺泡炎。對(duì)感染小鼠的肺臟細(xì)胞因子檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，p-H1N1能夠更顯著地誘導(dǎo)炎癥因子表達(dá)，而檢測(cè)到的抗炎因子和抗病毒因子表達(dá)較低。為了找到病毒與

3、BALB/C小鼠致病性之間的關(guān)系，本研究比較了p-H1N1，h-H1N1和經(jīng)典的H1N1亞型SIV(c-H1N1)在氨基酸水平上的差異，并在HA，PA，PB2和NS1蛋白上發(fā)現(xiàn)了6個(gè)共同的氨基酸位點(diǎn)突變：HA：E103D、P145S；NS1：V123I；PB2：I588T；PA：V70A、E547D。總之，這些研究表明與h-H1N1相比，p-H1N1感染小鼠模型后表現(xiàn)為毒力增強(qiáng)。
　　 鑒于2009/H1N1流感病毒是從豬體內(nèi)分

4、離到的，通過比較p-H1N1與c-H1N1對(duì)BALB/C小鼠的致病性差異、在豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)上的增殖差異以及檢測(cè)感染PAM細(xì)胞后炎癥細(xì)胞因子、凋亡相關(guān)因子、細(xì)胞黏附相關(guān)分子和抗病毒細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與c-H1N1相比，p-H1N1能夠顯著降低小鼠體重，在PAM細(xì)胞上增殖能力更強(qiáng)。PAM上細(xì)胞因子檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，感染后3h和6h，二者誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎癥因子如白介素類細(xì)胞因子，無顯著差異。感染后12h，c-H1N1對(duì)所有細(xì)胞因子