IL-21與非洲雛駝鳥腸黏膜免疫.pdf

1、非洲鴕鳥育雛期較長(zhǎng)，從1d到90d雛鴕鳥腸黏膜免疫系統(tǒng)容易遭受外來(lái)抗原的入侵，給鴕鳥養(yǎng)殖帶來(lái)巨大損失。近年研究中發(fā)現(xiàn)腸黏膜免疫與白介素21(interleukin-21，IL-21)有密切聯(lián)系，但是IL-21在非洲鴕鳥腸黏膜免疫中的研究并未見報(bào)道。本研究取1d、45d、90d和成年鴕鳥腸道、大腦和外周血，通過(guò)解剖學(xué)技術(shù)、透射電鏡技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)，對(duì)育雛期鴕鳥腸黏膜免疫和IL-21進(jìn)行多層面研究。為育雛期鴕鳥飼養(yǎng)管理

2、、生理機(jī)能研究和疾病防治提供可靠的形態(tài)學(xué)依據(jù)和理論指導(dǎo)。研究結(jié)果如下:
　　 1非洲鴕鳥腸黏膜層超微結(jié)構(gòu)發(fā)育變化
　　 利用透射電鏡技術(shù)對(duì)1d和成年鴕鳥腸道黏膜層超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1d雛鴕鳥腸黏膜微絨毛排列整齊有序，固有層細(xì)胞完整，線粒體豐富，吸收細(xì)胞排列緊密，細(xì)胞核明顯，細(xì)胞膜完整;成年非洲鴕鳥腸黏膜微絨毛排列雜亂無(wú)章，固有層細(xì)胞有不完整現(xiàn)象，吸收細(xì)胞有多核仁現(xiàn)象。結(jié)果表明，隨著日齡的增加腸道免疫保護(hù)屏障增強(qiáng)

3、。
　　 2非洲鴕鳥腸皺襞和神經(jīng)叢的發(fā)育變化
　　 采用HE染色和PAS染色對(duì)鴕鳥腸道染色，結(jié)果發(fā)現(xiàn)非洲鴕鳥小腸有皺襞現(xiàn)象，腸道神經(jīng)叢異常豐富。1d鴕鳥腸道肌間神經(jīng)叢呈束狀排列，橫切面呈圓形或橢圓形，肌間神經(jīng)叢內(nèi)的細(xì)胞體積小但排列緊密，隨著日齡的增加肌間神經(jīng)叢的橫切面變長(zhǎng)，呈條帶狀，神經(jīng)叢內(nèi)細(xì)胞體積大，且排列疏松。推測(cè)鴕鳥小腸皺襞的形成與其食性有關(guān)，鴕鳥腸神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)腸道功能的調(diào)節(jié)更加準(zhǔn)確。
　　 3非洲鴕鳥腸道黏

4、膜免疫細(xì)胞的發(fā)育變化
　　 1)采用HE和PAS染色法，分別對(duì)非洲鴕鳥腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律進(jìn)行研究。鏡下觀察，上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞體積小，細(xì)胞核深藍(lán)色;杯狀細(xì)胞呈紅色，內(nèi)含大量的黏原顆粒。數(shù)量統(tǒng)計(jì)，上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞在回腸數(shù)量最多;小腸杯狀細(xì)胞和上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量在45d達(dá)最多;大腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量在90d達(dá)最多;大腸杯狀細(xì)胞數(shù)量隨日齡增加而增多。說(shuō)明上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞在鴕鳥育雛早期腸黏膜免疫中起著重要作用，且在育

5、雛期腸黏膜免疫系統(tǒng)隨鴕鳥日齡增加而不斷完善。
　　 2)采用改良的甲苯胺藍(lán)染色法，研究非洲鴕鳥腸道肥大細(xì)胞的分布、形態(tài)、發(fā)育規(guī)律，探討肥大細(xì)胞與腸黏膜免疫的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，非洲鴕鳥腸道肥大細(xì)胞形態(tài)多樣，黏膜固有層中大量分布，而肌層中未見分布。1d和45d鴕鳥腸道肥大細(xì)胞形態(tài)正常，90d鴕鳥腸道肥大細(xì)胞有輕微脫顆?，F(xiàn)象，成年鴕鳥肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象明顯?？漳c和回腸肥大細(xì)胞相對(duì)較多，肥大細(xì)胞的數(shù)量隨著年齡的增加而增多。結(jié)果說(shuō)明，非洲鴕

6、鳥腸道肥大細(xì)胞多為黏膜型，是參與腸黏膜免疫的主要細(xì)胞，肥大細(xì)胞的隨日齡的增多預(yù)示著鴕鳥腸道黏膜免疫系統(tǒng)日趨完善。
　　 4非洲鴕鳥血清中IL-21的水平
　　 為了研究非洲鴕鳥血清中IL-21與腸道黏膜免疫的關(guān)系，采用夾心ELISA的方法檢測(cè)非洲鴕鳥外周血IL-21的濃度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，非洲鴕鳥育雛期間血清中IL-21的濃度從1d到90d呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，成年鴕鳥血清IL-21濃度最低。為非洲鴕鳥炎癥的快速診斷提供重要的參

7、考指標(biāo)。
　　 5 IL-21在非洲鴕鳥腸道和大腦的分布及變化
　　 為了探討IL-21在腸黏膜免疫以及腦-腸軸中的作用，采用免疫組化的方法研究IL-21在腸道和大腦的分布和發(fā)育變化。結(jié)果顯示，IL-21在非洲鴕鳥腸道中主要分布在黏膜固有層、黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢。固有層陽(yáng)性細(xì)胞小而圓，神經(jīng)叢內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞體積大，細(xì)胞多有突起。且腸道陽(yáng)性細(xì)胞分布位置逐漸向腸腔內(nèi)延伸。IL-21陽(yáng)性細(xì)胞在小腸內(nèi)的數(shù)量比大腸多。90d和成年陽(yáng)