IL-17和IL-21在腎移植受者中的表達(dá)及其與排斥反應(yīng)的關(guān)系.pdf

1、目的:
　　通過研究Th17/IL-17&IL-21與移植腎發(fā)生排斥反應(yīng)的相關(guān)性,探索排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制,為臨床診斷和防治排斥反應(yīng)提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:
　　1、嚴(yán)格按照納入標(biāo)準(zhǔn)選取我院健康體檢人員15名及腎移植術(shù)后穿刺及復(fù)查患者47名,分為四組:正常組(15例)、腎功能穩(wěn)定組(20例)、急性排斥組(15例)和慢性排斥組(12例)。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)檢測這四組研究對象

2、外周血PBMC中IL-17mRNA、IL-21mRNA的相對表達(dá)水平,比較各組間差異及分析其與血清肌酐、排斥時(shí)間等指標(biāo)的相關(guān)性。
　　2、嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)選取在我院因移植腎失功行移植腎切除術(shù)并根據(jù)病理結(jié)果分為兩組,即急性排斥組6例,慢性排斥組6例。同時(shí)選取正常對照組6例,為在我院行腎惡性腫瘤切除術(shù)的患者。應(yīng)用HE染色及免疫組化染色法分析IL-17+細(xì)胞、IL-21+細(xì)胞在移植腎組織的浸潤情況,比較各組間差異及分析其與移植腎存活時(shí)間和阻

3、力指數(shù)等指標(biāo)的相關(guān)性。
　　3、建立小鼠腎臟移植模型,將實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為同系移植組15對和急性排斥組15對。然后采用流式細(xì)胞術(shù)對小鼠移植腎組織中的Th17細(xì)胞進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果:
　　1、RT-PCR結(jié)果:
　　1.1以正常組為參照組,IL-17mRNA在急性排斥組與穩(wěn)定組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-17mRNA在慢性排斥組中的表達(dá)較穩(wěn)定組升高了2.89倍,p<0.01,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　1.2以正

4、常組為參照組,IL-21mRNA在急性排斥組中的表達(dá)較穩(wěn)定組升高了1.92倍,在慢性排斥組中的表達(dá)較穩(wěn)定組升高了3.19倍,p<0.01,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　1.3在急排組,經(jīng)相關(guān)分析,IL-17mRNA和IL-21mRNA與肌酐的相關(guān)系數(shù)分別是 r=-0.2937和-0.2303,p=0.288和0.409;與術(shù)后排斥時(shí)間相關(guān)系數(shù)分別是r=-0.2642和-0.1095,p=0.341和0.698;差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p

5、>0.05)。在慢排組,經(jīng)相關(guān)分析,IL-17、IL-21與肌酐的相關(guān)系數(shù)分別是r=-0.0921、-0.3136, p=0.776、0.321;與術(shù)后排斥時(shí)間相關(guān)系數(shù)分別是r=0.1625、0.4801, p=0.614、0.114;差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　2、免疫組化結(jié)果:
　　2.1在正常腎臟組織中未見 IL-17+細(xì)胞浸潤;IL-17+細(xì)胞在急性排斥反應(yīng)移植腎組織中的表達(dá)為(2-11)個(gè)/mm2,平

6、均為(6.00±2.97)個(gè)/mm2;在慢性排斥反應(yīng)移植腎組織中的表達(dá)為(3-14)個(gè)/mm2,平均為(6.67±3.88)個(gè)/mm2。IL-17+細(xì)胞 IL-17+細(xì)胞數(shù)在三組腎臟組織中的表達(dá)為非正態(tài)數(shù)據(jù),故經(jīng)秩和檢驗(yàn)H=11.395,P=0.0034<0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.2在正常腎臟組織中未見 IL-21+細(xì)胞浸潤;IL-21+細(xì)胞在急性排斥患者移植腎組織內(nèi)的表達(dá)為(1-5)個(gè)/mm2,平均為(2.33±1

7、.75)個(gè)/mm2;在慢性排斥患者的表達(dá)為(4-9)個(gè)/mm2,平均為(6.83±1.72)個(gè)/mm2;IL-21+細(xì)胞在三組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000<0.05)。
　　2.3 IL-17和 IL-21著染于炎癥細(xì)胞胞內(nèi),腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞胞內(nèi)未見 IL-17和IL-21著染。
　　2.4在急排組,IL-17+細(xì)胞、IL-21+細(xì)胞數(shù)分別與移植腎存活時(shí)間行相關(guān)分析檢驗(yàn),相關(guān)系數(shù)r=-0.1260和-0.4411,p=0

8、.812和0.381;IL-17+細(xì)胞、IL-21+細(xì)胞數(shù)分別與阻力指數(shù) RI經(jīng)相關(guān)分析,相關(guān)系數(shù) r=0.4736和0.3880,p=0.343和0.447;p值均大于0.05,差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在慢排組,IL-17+細(xì)胞、IL-21+細(xì)胞數(shù)分別與移植腎存活時(shí)間行相關(guān)分析檢驗(yàn),相關(guān)系數(shù) r=0.1494和0.2031, p=0.778和0.700;IL-17+細(xì)胞、IL-21+細(xì)胞數(shù)分別與阻力指數(shù)RI經(jīng)相關(guān)分析,相關(guān)系數(shù)r=0.2

9、042和0.2368,p=0.698和0.651;p值均大于0.05,差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　在同系移植組,Th17細(xì)胞占浸潤的T淋巴細(xì)胞比例為(0.27±0.08)％。在急性排斥組,Th17細(xì)胞占浸潤的T淋巴細(xì)胞比例為(1.49±0.37)%。急性排斥組和同系移植組Th17細(xì)胞的百分比經(jīng)t檢驗(yàn)為t=10.707,P=0.0000,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:
　　1、IL-21可能參與了急性和