OPN和IL-18在大鼠腎移植急性排斥反應(yīng)中的表達研究.pdf

1、目的：(1)建立大鼠同種異體腎移植模型；(2)探討OPN及IL-18在大鼠腎移植急性排斥反應(yīng)中的變化規(guī)律及早期預(yù)測排斥反應(yīng)的價值。 方法：(1)運用顯微外科技術(shù)建立大鼠同種異體腎移植模型，進行部分技術(shù)改進。采取供腎動脈瓣、下腔靜脈與受體腹主動脈、下腔靜脈行端側(cè)吻合。以雄性SD大鼠為受體，Wistar大鼠為供體，分為2組：對照組為SD-SD同系移植組；實驗組為Wistar-SD異系移植組。(2)每組大鼠腎移植術(shù)后第1，3，5，7天

2、取移植腎及血。采用實時熒光定量PCR檢測移植腎OPN及IL-18mRNA表達。ELISA法檢測外周血清OPN及IL-18的濃度。生化儀檢測血清肌酐。光鏡及電鏡觀察觀察移植腎的病理及超微結(jié)構(gòu)改變，并同時觀察兩組大鼠腎移植術(shù)后的生存時間。 結(jié)果：(1)改進部分手術(shù)方式，降低吻合的難度。手術(shù)時間90-115分鐘，平均99.1±9.84分鐘。其中熱缺血時間為1-2秒鐘，冷缺血時間為35-40分鐘。血管吻合時間20-30分鐘。手術(shù)成功率為

3、88.33％。(2)對照組大鼠生存時間超過100天，實驗組大鼠生存時間為7.2±0.84天。對照組術(shù)后第1，3，5，7天血清肌酐、移植腎中OPN及IL-18mRNA、外周血OPN及IL-18濃度未見明顯變化，病理未見排斥反應(yīng)變化。透射電鏡觀察細胞器形態(tài)規(guī)則，無明顯異常改變。實驗組術(shù)后第1，3，5，7天血清肌酐逐步升高，在第7天達到高峰(501.40±57.53vs47.31±4.16，P<0.01)。移植腎內(nèi)OPN及IL-18mRNA表

4、達均明顯上調(diào)，其中OPN mRNA在第3天表達顯著上調(diào)，第5天達到高峰(106.79±8.34vs15.67±1.36，P<0.01)，第7天持續(xù)高水平表達。IL-18 mRNA在第5天表達顯著上調(diào)，達到高峰(76.00±5.47vs6.82±0.44，P<0.01)，第7天仍持續(xù)高表達。外周血中OPN及IL-18的濃度有相同的變化規(guī)律。病理觀察對照組腎臟未見明顯排斥反應(yīng)，對照組移植腎第3天出現(xiàn)輕度的排斥反應(yīng)，第5，7天表現(xiàn)為中度一重度

5、的排斥反應(yīng)。電鏡觀察移植腎腎小球變性，足突細胞腫脹、變性、脫落，腎小管微絨毛變性、增粗。 結(jié)論：(1)運用供腎動脈瓣及下腔靜脈與受體腹主動脈及下腔靜脈作端側(cè)吻合，能保證大鼠腎移植的高成功率；(2)以Wistar為供體，SD大鼠為受體的腎移植是一個高排斥反應(yīng)，可以應(yīng)用于腎移植急性排斥反應(yīng)的研究；(3)OPN和IL-18均在。腎移植急性排斥反應(yīng)發(fā)生時出現(xiàn)表達上調(diào)，OPN在早期的表達上調(diào)更為顯著；(4)腎移植術(shù)后血清中OPN及IL-1