紫色馬鈴薯花色苷分離純化及降脂減肥活性研究.pdf

1、紫馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）起源于南美洲安第斯山脈地區(qū)，由于其塊莖中富含?；幕ㄉ眨絹碓蕉嗟难芯空唛_始關(guān)注其在天然色素及保健功能方面的應(yīng)用價(jià)值。本文采用高速逆流色譜(HSCCC)及制備液相色譜(Pre-HPLC)對(duì)紫馬鈴薯中的花色苷組分進(jìn)行分離純化，通過紫外-可見光譜及質(zhì)譜對(duì)所得到的兩種花色苷單體進(jìn)行結(jié)構(gòu)的初步鑒定;采用體外細(xì)胞試驗(yàn)研究了紫馬鈴薯花色苷粗提物及單體對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖、周期、凋亡及分化

2、方面的影響;最后通過大鼠體內(nèi)試驗(yàn)探討紫馬鈴薯花色苷粗提物的降脂減肥作用，為紫馬鈴薯天然色素的分離鑒定，功能性成分及產(chǎn)品的開發(fā)提供理論支持。主要研究結(jié)論如下:
　　(1)采用高速逆流色譜(HSCCC)與制備液相色譜(Pre-HPLC)聯(lián)用的方法從紫馬鈴薯肉花色苷提取物(AEPPF)中分離得到兩種主要的花色苷。高速逆流色譜(HSCCC)以乙酸乙酯-正丁醇-水-三氟乙酸(1∶3∶5∶0.1％，v/v)為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)

3、相，流速2mL/min，進(jìn)樣量為100mg，初步分離得到40mg花色苷A（純度56.4％）和11mg花色苷B（純度45.6％）。接著利用制備液相色譜進(jìn)一步純化，得到10mg花色苷單體A（純度97.8％）及3mg花色苷單體B（純度97.7％）。花色苷結(jié)構(gòu)通過紫外-可見光譜及質(zhì)譜進(jìn)行初步鑒定，推測(cè)花色苷A為矮牽牛色素-3-O-對(duì)香豆酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷，花色苷B為芍藥素-3-O-對(duì)香豆酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷。
　　(2)

4、研究紫馬鈴薯花色苷提取物對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖分化的影響。采用MTT法檢測(cè)紫馬鈴薯肉和皮花色苷提取物(AEPPF，AEPPP)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制效果并確定半抑制濃度(IC50);采用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期及凋亡情況;對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化，油紅O染色比色分析AEPPF及AEPPP對(duì)其分化程度的影響。研究結(jié)果表明紫馬鈴薯花色苷提取物能顯著地抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖且隨濃度的增大抑制效果增強(qiáng)，AEPPF和AEPPP

5、處理24h之后的IC50分別為92.0μg/mL和26.9μg/mL;能有效的誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且對(duì)細(xì)胞的G2/M期產(chǎn)生阻滯作用;紫馬鈴薯花色苷提取物能顯著地抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化，減少細(xì)胞中脂質(zhì)的沉積。20μg/mL、40μg/mL和80μg/mL的AEPPF處理組的細(xì)胞，其脂肪含量分別下降了16.1％、26.7％和29.6％，而20μg/mLAEPPP處理組的細(xì)胞，其脂肪含量下降了39.5％，與對(duì)照組相比，具有極顯著性差異(p＜

6、0.01)。
　　(3)采用大鼠體內(nèi)試驗(yàn)進(jìn)一步研究紫馬鈴薯花色苷提取物在減肥降脂方面的功能活性。將48只SD大鼠隨機(jī)分為如下6組:普通對(duì)照組(control)、高脂飼料組(HF)、高脂飼料中添加低劑量紫馬鈴薯肉花色苷提取物組(1g/kg，1‰AEPPF)、高脂飼料中添加高劑量紫馬鈴薯肉花色苷提取物組(5g/kg，5‰AEPPF)、高臘飼料中添加低劑量紫馬鈴薯皮花色苷提取物組（0.5g/kg，0.5‰AEPPP）、高脂飼料中添加高劑

7、量紫馬鈴薯皮花色苷提取物組(1g/kg，1‰AEPPP)。記錄大鼠每日采食量和體重變化。研究發(fā)現(xiàn)，飼喂四周后，1‰AEPPF和5‰AEPPF組大鼠體重明顯低于HF組(p＜0.05)，且添加花色苷各組大鼠的Lee's指數(shù)均顯著低于HF組。1‰AEPPF組大鼠腎周脂肪及附睪脂肪總重量明顯低于HF組(p＜0.05)，5‰AEPPF、0.5‰AEPPP及1‰AEPPP組大鼠肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性相比HF組得到明顯提高(p＜0.05)，