紫薯花色苷提取純化及其抗氧化活性研究.pdf

1、紫薯（Ipomoea batatas L.）為旋花科番薯屬，一年生植物，具有高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、成本低廉等特點;紫薯中的花色苷具有抗氧化、抗突變、抑菌、降血壓等生理功效，極具開發(fā)利用價值。本論文研究了紫薯花色苷提取工藝，并進(jìn)行了兩種樹脂聯(lián)合純化工藝研究，最后初步分析了紫薯花色苷不同純化產(chǎn)物的組成成分，并對各純化產(chǎn)物的抗氧化活性進(jìn)行了研究。研究結(jié)果如下:
　　(1)響應(yīng)面聯(lián)合因子設(shè)計優(yōu)化酸性乙醇提取紫薯花色苷最佳工藝參數(shù)為:乙醇60％，pH2

2、.0，液料比40∶1，時間84min，溫度74℃;在此條件下，花色苷得率為419.529mg/100g。對紫薯粉重復(fù)提取三次，以三次提取總量為100％，三次得率占比分別是91.86％、6.40％和1.74％。據(jù)此選定紫薯花色苷提取次數(shù)為1次。
　　(2)兩種樹脂聯(lián)合純化工藝分三步進(jìn)行:首先，通過對AB-8樹脂和聚酰胺樹脂的靜態(tài)吸附解吸研究得出，兩種樹脂均有吸附率大、解吸率高的特點，適合紫薯花色苷類成分純化。兩種樹脂對花色苷的吸附屬

3、于多分子層吸附，靜態(tài)吸附解吸條件為:吸附平衡時間為2h，解吸平衡時間為1h，吸附溫度為30℃，用60％乙醇作為解吸液，40℃進(jìn)行解吸。然后，考察了AB-8樹脂純化工藝。采用上樣濃度4mg/mL的提取液以2mL/min進(jìn)行動態(tài)吸附，上樣量20BV，再以4BV的60％乙醇(pH3.0)進(jìn)行解吸，可獲得樣品M2，其色價為32.36，純度45.30％。同時考察了聚酰胺樹脂純化工藝。采用上樣濃度4mg/mL的提取液以1.5mL/min進(jìn)行動態(tài)吸附

4、，上樣量14.4BV，再以4BV的60％乙醇(pH3.0)進(jìn)行解吸，獲得樣品M3，其色價為41.67，純度58.48％。最后，采用聚酰胺柱對M2進(jìn)一步分離。以不同梯度的乙醇進(jìn)行洗脫，得四種級分F1、F2、F3、F4，其色價與純度較粗提物及一次純化物均有顯著提升，以F2回收效果為最佳，其色價為95.88，純度84.24％。
　　(3)對花色苷純化的不同產(chǎn)物進(jìn)行組分分析，發(fā)現(xiàn)AB-8樹脂純化物M2與聚酰胺樹脂純化物M3峰形相同但較粗提

5、物M1峰形明顯不同，兩級純化并以梯度乙醇洗脫得到的F1、F2、F3、F4經(jīng)HPLC上樣測定顯示，所得圖譜峰形各異，且出峰量較少，說明梯度洗脫能對花色苷進(jìn)一步分離。
　　(4)抗氧化活性研究表明，紫薯花色苷各純化產(chǎn)物對DPPH·自由基及羥基自由基均有良好的抑制作用。兩級純化產(chǎn)物抗氧化效果優(yōu)于粗提物及一級純化物，其中又以組分F2、F3抗氧化性能最佳。組分F2對DPPH·自由基和OH·自由基清除能力的IC50分別為0.002mg/mL和