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1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文兔凝血酶的分離純化及部分性質(zhì)與功能基團(tuán)研究姓名:王松申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:唐云明20100501西南大學(xué)碩士學(xué)何論文Purification,somepropertiesandmodificationofgroupsoftheThrombinfromOryctolaguscuniculusDiscipline:BiochemistryandMolecularBiologyDirecti
2、on:EnzymeandEnzymeEngineeringSupervisor:ProfTangYunmingMasterCandidate:WangSongAbstractThrombin(EC34215)isanaturalenzymeinthebody。SCoagulationSystemanditisalsoveryimportantasaSereproteaseItcandirectlyactOilthefibrinogena
3、ndhydrolyzes4ArgGlypeptidebondofthefibrinogen,whichmakesfibrinogenbecometofibrinforcongealingthebloodThrombiniswidelyusedinpharmaceuticalindustryItCallbeusedinlocalbleeding,andalsototreatdiseasessuchasfalseaneurysmwitllf
4、ibrinogentogetherPurifiedThrombinsolutionfromrabbit(Oryctolaguscuniculus)bloodwaspreparedbybariumcitrateabsorptionfirstandfurtherstepwisepurifiedbydialysis,freezedrying,DEAEsepharosechromatographyandSuperdexS200gelfiltra
5、tionTheresultsshowedpurificationtimesof4118,relativeenzymeactivityof15071U/rag,andrecoveryrateof1649%Themolecularweightofthisenzymeisabout35KDItissensitivetopHandtemperatureandstableatpHbetween5to8,withoptimalpHat74andte
6、mperatureat38“CEnzymeactivitydecreasedrapidlyatabove50。CEnzymeactivitycouldbeactivatedbyZn2、Cu2andlargelyinhibitedbyFe”Also,inhibitione能ctswereobviouslyobservedinorganicsolventswithorder:isoproponolethyleneglycolethanol;
7、andnosignificantinhibitioneffectWasobservedinmethan01IodophorsCanstronglyinhibittheactivityofthrombin,andGlutaraldehydeandotherexteriordrugshaveacertaininhibitoryeffect011itexceptCompoundalcoholdisinfectantTheRabbitThrom
8、bincanbeusedOilmedicalindustrybycomparingitssomepropertieswiththoseofHumanThrombinThethrombinWasselectivelymodifiedbyPMSFNBS,IAc,BrAc,TNBS,SUAN,PCMB,DTTNAI,BD,ChloramineTandchangesintheactivitiesofthegTizymehavebeendetec
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