促甲狀腺激素影響脂肪分布及脂肪細胞脂肪因子表達的實驗研究.pdf

1、第一部分，前言：
　　 肥胖是指體內(nèi)脂肪堆積過多和(或)分布異常,體重增加,是一種多因素的慢性代謝性疾病。它嚴重危害著人類的健康,中心型肥胖更是心血管疾病發(fā)生、發(fā)展過程中的獨立危險因素。目前已有多篇研究證實甲狀腺功能與肥胖之間存在一定的聯(lián)系,盡管這種關聯(lián)的病因?qū)W機制尚未被闡明。早在30年前,就有研究指出臨床甲狀腺功能減退癥會引起體重的增加以及一系列的心血管事件。近來的研究表明,亞臨床甲狀腺功能減退癥的患者甚至甲狀腺功能正常的人群

2、,促甲狀腺激素水平與體重指數(shù)同樣存在正相關。
　　 關于甲狀腺功能與脂肪分布的研究為數(shù)不多。DePergola等人對甲狀腺功能正常的超重/肥胖女性進行了研究,結(jié)果顯示腰圍(中心型肥胖)與TSH及游離三碘甲腺原氨酸呈獨立正相關。AlevizakiM等人應用超聲測定腹部皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪面積并分析了其與甲狀腺功能的相關性,發(fā)現(xiàn)皮下脂肪與游離甲狀腺素呈負相關,并且FT4為皮下脂肪的獨立預測因子。此后,WesterinkJ等學者同樣采用

3、超聲測定脂肪面積并分析其與TSH的相關性,結(jié)果顯示在66歲以上的人群中,TSH與內(nèi)臟脂肪呈正相關,而在其他年齡段,并未發(fā)現(xiàn)TSH與內(nèi)臟脂肪的這種正性相關。
　　 本研究擬采用核磁共振檢測腹部皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪面積,分析其與甲狀腺功能之間的相關性,探討甲狀腺功能對腹部脂肪分布的影響。
　　 方法：
　　 隨機選取沈陽市南站社區(qū)40至65歲居民為研究對象,排除因各種原因(心臟支架、心臟起搏器、體內(nèi)金屬植入物、無檢查意

4、愿等)未行核磁共振檢查者,已知甲狀腺疾病并服用甲狀腺激素藥物或抗甲狀腺藥物治療者,服用影響甲狀腺功能的藥物者(避孕藥或雌激素等),懷孕或產(chǎn)后一年內(nèi)者,經(jīng)甲狀腺功能測定診斷為臨床甲減和臨床甲亢者,最終611人納入研究,其中男性307人,年齡(50.13±6.80)歲,女性304人,年齡(50.29±6.59)歲。所有研究對象進行詳細的問卷調(diào)查,測定身高、體重、腰圍、臀圍、血壓,計算體重指數(shù)和腰臀比。應用“TanitaTBF300A”體脂儀

5、測定體脂含量。采集空腹血檢測空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹胰島素,并行口服葡萄糖耐量試驗測定2小時靜脈血漿葡萄糖,計算HOMA-IR。測定TSH、FT4、FT3和TPOAb。在第四腰椎至第五腰椎的的平臍孔水平,應用核磁共振掃描,采用SLICE-O-MATICversion4.2軟件畫圖,計算皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪面積。采用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理。
　　 結(jié)果：
　　

6、 1、TSH與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關性
　　 Pearson相關分析顯示,LnTSH與SF呈正相關(r=0.183,P=0.000),而與VF無相關。從性別上來看,在男性中LnTSH與SF及VF均無相關,而女性LnTSH與SF呈正相關(r=0.133,P=0.02),VF呈正相關(r=0.136,P=0.018)。按照BMI進行分組,超重/肥胖組的LnTSH與SF呈正相關,且相關性更為明顯(r=0.253,P=0.000),非

7、超重組的LnTSH與SF同樣呈現(xiàn)正相關,但相關性較弱(r=0.108,P=0.047),而兩組人群LnTSH均與VF無關。按照TPOAb陽性與否進行分組,TPOAb陽性組LnTSH與SF呈正相關,且相關性明顯(r=0.345,P=0.009),在TPOAb陰性組,LnTSH與sF同樣呈現(xiàn)正相關,但相關性沒有TPOAb陽性組明顯(r=0.137,P=0.001),而兩組人群LnTSH均與VF無關。按照內(nèi)臟脂肪面積進行分組,腹型肥胖組LnT

8、SH與SF呈正相關(r=0.220,P=0.000),非腹型肥胖組LnTSH與SF同樣呈正相關,但相關性沒有腹型肥胖組明顯(r=0.161,P=0.003),兩組人群LnTSH均與VF無關。
　　 2、FT4與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關性
　　 Pearson相關分析顯示,FT4與SF呈負相關(r=-0.164,P=0.000),與VF呈正相關(r=0.118,P=0.004)。從性別上進行分析,無論在男性還是女性FT4與

9、SF均無相關。按照BMI進行分組,超重/肥胖組的FT4與SF呈負相關(r=-0.172,P=0.004),其FT4與VF無相關,在非超重組,FT4與SF呈負相關(r=-0.161,P=0.003),其FT4與VF呈正相關(r=0.244,P=0.000)。按照TPOAb陽性與否進行分組,TPOAb陽性組的FT4與SF呈明顯負相關(r=-0.291,P=0.030),其FT4與VF無相關,在TPOAb陰性組,FT4與SF同樣存在負相關(r

10、=-0.142,P=0.001),其FT4與VF呈正相關(r=132,P=0.002),按照內(nèi)臟脂肪面積進行分組,腹型肥胖組FT4與SF呈負相關(r=-0.189,P=0.002),在非腹型肥胖組,FT4與SF同樣呈負相關(r=-0.188,P=0.001),兩組人群FT4與VF均無相關。
　　 3、FT3與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關性
　　 Pearson相關分析顯示,FT3與SF呈負相關(r=-0.098,P=0.01

11、5),與VF呈正相關(r=0.261,P=0.000)。從性別上進行分析,無論在男性還是女性均未見FT3與SF及VF的相關性。按照BMI進行分組,超重/肥胖組的FT3與SF呈負相關(r=-0.147,P=0.015),其FT3與vF呈正相關(r=0.205,P=0.001),在非超重組,FT3與SF呈負相關(r=-0.241,P=0.000),其FT3與VF呈正相關(r=0.235,P=0.000)。按照TPOAb陽性與否進行分組,TP

12、OAb陽性組FT3與SF無相關,其FT3與VF呈正相關(r=0.342,P=0.010),在TPOAb陰性組,FT3與SF呈負相關(r=-0.112,P=0.008),與VF呈正相關(r=0.253,P=0.000),按照內(nèi)臟脂肪面積進行分組,腹型肥胖組FT3與SF及VF均無相關,非腹型肥胖組的FT3與SF呈負相關(r=-0.218,P=0.000),其FT3與VF呈正相關(r=0.117,P=0.033)。
　　 4、影響皮下

13、脂肪及內(nèi)臟脂肪面積的多因素分析
　　 將Pearson相關分析中與皮下脂肪或內(nèi)臟脂肪有相關的變量帶入多因素線性回歸模型,結(jié)果顯示TSH增高及FT3降低是預測皮下脂肪面積的危險因素。
　　 結(jié)論：
　　 流行病學的橫斷面研究結(jié)果顯示血清TSH增高及正常范圍內(nèi)的FT3降低是預測皮下脂肪面積的危險因素,提示血清TSH及FT3可能在體內(nèi)脂肪的分布上發(fā)揮著一定的作用。
　　 第二部分，前言：
　　 脂肪組織

14、是體內(nèi)巨大的能量儲備系統(tǒng),它對維持機體的能量平衡有著重要作用。脂肪細胞的增殖、分化異?？梢鹬窘M織的過多堆積,繼而導致肥胖和胰島素抵抗,是動脈粥樣硬化、2型糖尿病、高血壓和脂代謝障礙等多種疾病的共同危險因素?，F(xiàn)已知道脂肪組織表達和分泌多種生物活性肽,這些多肽稱為脂肪因子或脂肪細胞因子。除此之外,脂肪組織還有多種受體表達,使其能對傳統(tǒng)的內(nèi)分泌系統(tǒng)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)起到應答反應。
　　 在甲減狀態(tài)下,瘦素的水平變化不同研究所得出的結(jié)果

15、不盡相同,可升高、降低或無明顯變化。在甲減的患者或動物模型中,血漿脂聯(lián)素水平可表現(xiàn)為明顯下降、或升高或無明顯改變。同樣甲減狀態(tài)下TNT-α及IL-6的水平變化亦無定論。
　　 本研究擬采用體內(nèi)實驗及體外實驗探討TSH增高狀態(tài)下,脂肪細胞瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α及白細胞介素6的表達的變化。
　　 方法：
　　 將24只Wistar大鼠隨機分成3組(每組n=8):①完全甲減組(CH):手術完全切除甲狀腺,皮下注射

16、0.9%的氯化鈉溶液。②正常對照組(C):行甲狀腺切除假手術、皮下注射0.9%的氯化鈉溶液。③亞臨床甲減組(SCH):手術切除甲狀腺,于頸背部每日皮下注射L-T4溶液1.0μg/(100g·d)建立亞臨床甲減模型。留取附睪周圍的內(nèi)臟脂肪組織,應用WesternBlot技術檢測其瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α、白細胞介素6在蛋白水平的表達,應用RealtimePCR技術檢測上述指標在mRNA水平的表達。
　　 采用經(jīng)典方法誘導3T3

17、L1細胞分化為成熟的脂肪細胞,給予其外源性的促甲狀腺激素(TSH)的刺激,濃度分別為0(對照組)、0.05mIU/m1、0.5mIU/ml、5mIU/ml及50mIU/ml,應用ELISA法測定細胞上清瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α及白細胞介素6的表達,應用WesternBlot技術及RealtimePCR技術測定上述指標在蛋白水平及mRNA水平的表達。采用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理。
　　 結(jié)果：
　　 1、

18、大鼠脂肪組織脂肪因子表達
　　 亞臨床甲減組及臨床甲減組大鼠脂肪組織瘦素、腫瘤壞死因子α及白細胞介素6的表達高于對照組,而脂聯(lián)素的表達低于對照組,臨床甲減組大鼠脂肪組織瘦素、腫瘤壞死因子α及白細胞介素6的表達高于亞臨床甲減組,而脂聯(lián)素的表達低于亞臨床甲減組。
　　 2、分化的3T3L1細胞脂肪因子的表達
　　 隨著TSH濃度的增高,細胞上清瘦素、腫瘤壞死因子α及白細胞介素6水平呈現(xiàn)上升趨勢,而細胞上清中未檢出脂聯(lián)