兒童Graves病TH1-TH2細(xì)胞極化偏移的研究.pdf

1、目的：Graves病(GD)是兒童常見(jiàn)的自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)。Th1/Th2細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的打破，致使細(xì)胞因子失衡是發(fā)病的主要原因。但GD的Th1/Th2極化偏移是向Th1還是向Th2細(xì)胞方向，一直存在爭(zhēng)議。我們通過(guò)檢測(cè)GD、HT和正常兒童的T淋巴細(xì)胞亞群水平、細(xì)胞因子水平、免疫淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物水平以及轉(zhuǎn)錄因子水平，從T淋巴細(xì)胞分化的多環(huán)節(jié)觀察兒童Graves病Th1/Th2類(lèi)細(xì)胞的極化偏移方向，探討GD的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。

2、 方法：選擇初診GD患兒22名，復(fù)診患兒36名；初診HT患兒24名，復(fù)診患兒40名；正常兒童50名。采用流式細(xì)胞術(shù)、ELISA法同步分別檢測(cè)初診AITD患兒和正常兒童的外周血T細(xì)胞亞群、sCD30值以及單個(gè)核細(xì)胞在脂多糖、植物血凝素誘導(dǎo)下產(chǎn)生的IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4比值。采用RT-PCR檢測(cè)初、復(fù)診AITD患兒和正常兒童的外周血T-bet、GATA3以及T-bet/GATA3值。并分析它們之間的相關(guān)關(guān)系。

3、結(jié)果： 1．細(xì)胞因子水平：GD初診組的IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4表達(dá)水平分別是：3972±1403pg/ml、286±76pg/ml、13.7±3.1，HT初診組是3578±1407pg/ml、266±94pg/ml、13.4±2.5，兩者與正常對(duì)照組(2431±1137pg/ml、385±173 pg/ml、6.5±2.1)相比，P值均<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2．T淋巴細(xì)胞亞群：GD組T淋巴細(xì)胞亞群

4、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+分別為：67.32±6.37％、30.82±3.38％、25.27±8.22％、1.31±0.32，HT組分別為65.54±4.97％、31.92±3.2％、26.63±4.19％、1.28±0.33，兩者與正常對(duì)照組(2431±1137pg/ml、385±173pg/ml、6.5±2.1)相比，P>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3．sCD30水平：GD初診組sCD30為122±58U

5、/ml，HT組為106±34U/ml，兩者與正常對(duì)照組(81+32U/ml)比較，P<0.01、0.02，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。初診GD組患者sCD30與TT3、TT4以及TSH的相關(guān)性分析結(jié)果為：r=0.444、P<0.05；r=0.604、P<0.05；r=0.298、P>0.05。初診HT(甲減組)患者sCD30與TT3、TT4以及TSH的相關(guān)性分析結(jié)果為：r=-0.592、P<0.05；r=0.548、P<0.05；r=-0.311、P

6、>0.05。 4．轉(zhuǎn)錄因子水平：GD初、復(fù)診組的T-bet、GATA3、T-bet/GATA3表達(dá)水平分別是：1.23±0.51、0.82±0.3、1.51±0.46，HT初、復(fù)診組是：1.11±0.45、0.81±0.20、1.36±0.42，兩者與正常對(duì)照組(0.73±0.45、1.01±0.61、0.76±0.31)相比，P值均<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論： 1.GD患兒細(xì)胞因子表現(xiàn)為IFN-γ升高、I

7、L-4降低，提示GD患兒體內(nèi)存在細(xì)胞因子水平的失衡，Th1/Th2細(xì)胞的偏移方向是向Th1方向偏移。 2.GD、HT患兒的T淋巴細(xì)胞亞群與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異，但其細(xì)胞因子水平已發(fā)生改變，提示CD4+T細(xì)胞功能發(fā)生改變更早。 3.GD存在有血漿sCD30水平升高的現(xiàn)象，分析提示：GDTh1活性增強(qiáng)是階段性改變，在免疫反應(yīng)的后期有可能在sCD30作用下，從Th1逐漸向 Th2細(xì)胞方向偏移，進(jìn)而引起抗原一抗體反應(yīng)導(dǎo)致其發(fā)病。