膠體金免疫層析法快速檢測(cè)流感病毒抗原方法的建立及應(yīng)用研究.pdf

1、背景:流行性感冒(簡(jiǎn)稱流感)是由流行性感冒病毒引起的急性呼吸道傳染病，其具有傳染性強(qiáng)，蔓延快及波及面廣的特點(diǎn)。流感的診斷不僅要根據(jù)臨床癥狀和體征，還需要實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)來(lái)證實(shí)?，F(xiàn)比較常用的檢測(cè)流感病毒的方法主要有病毒分離培養(yǎng)，酶免疫技術(shù)、間斷免疫熒光法及PCR技術(shù)。其中病毒的分離培養(yǎng)和間接免疫熒光法(IFA)均被認(rèn)為是診斷流感的金標(biāo)準(zhǔn)，但病毒分離培養(yǎng)整個(gè)過(guò)程往往需要2-14天，故對(duì)流感的早期診斷幫助不大；而IFA檢測(cè)病毒抗原是一種比較快速而準(zhǔn)

2、確的方法，因其具有穩(wěn)定、敏感、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用，但其缺點(diǎn)是需價(jià)格昂貴的免疫熒光顯微鏡，工作人員需具有一定的經(jīng)驗(yàn)。免疫膠體金技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的新方法，具有操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，該技術(shù)提供了很好的技術(shù)平臺(tái)，可能是一種更加便捷的檢測(cè)流感病毒抗原的好方法。 目的：建立有效、簡(jiǎn)便的膠體金免疫層析方法( GICA)快速檢測(cè)流感病毒感染。并應(yīng)用此方法快速檢測(cè)呼吸道疾病患者的流感病毒感染抗原，分析流感病毒感染的規(guī)律和

3、特點(diǎn)。 方法： 1.檢測(cè)對(duì)象為2007年2月-2009年1月期間在呼吸科住院的1042例各類呼吸道疾病患者，應(yīng)用GICA法檢測(cè)患者鼻咽部分泌物的流感病毒A、B抗原(FluA、B)，并同時(shí)用IFA法作對(duì)照，以驗(yàn)證GICA法檢測(cè)流感病毒抗原的敏感性和特異性。對(duì)其中GICA法檢測(cè)流感病毒抗原陽(yáng)性的60例標(biāo)本，及陰性的10例標(biāo)本同時(shí)行病毒分離培養(yǎng)，進(jìn)一步證實(shí)GICA法的可靠性。 2.分別應(yīng)用鼻、咽拭子法和鼻咽部細(xì)導(dǎo)管負(fù)壓

4、吸引法兩種不同方法采集患者鼻咽部分泌物，均經(jīng)GICA法快速檢測(cè)分泌物標(biāo)本中的Flu A、B抗原，對(duì)兩種不同采集方法的結(jié)果做出評(píng)價(jià)。 3.對(duì)1042例各類呼吸道疾病患者應(yīng)用GICA法檢測(cè)Flu A、B抗原的結(jié)果進(jìn)行分析，并對(duì)在不同季節(jié)，不同性別、年齡、病種及是否合并基礎(chǔ)病的呼吸道疾病患者的流感 結(jié)果： 1.GICA法與IFA法檢測(cè)Flu A、B結(jié)果有較好的一致性，兩種方法檢測(cè)結(jié)果之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

5、。病毒培養(yǎng)法與GICA法檢測(cè)Flu A、B結(jié)果符合率較高。 2.使用鼻、咽拭子法及鼻咽部細(xì)導(dǎo)管負(fù)壓吸引法采集患者鼻咽部分泌物快速檢測(cè)Flu A、B，所得結(jié)果有較好的一致性，兩種方法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.第一季度、四季度分別與第二、第三季度患者的Flu A、B檢出率比較，兩組結(jié)果差異有顯著性意義，第一、第四季度Flu A、B的檢出率高于其它二個(gè)季度。 男、女性別患者之間Flu A、B陽(yáng)性檢出率結(jié)果

6、差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 65歲以上及以下患者組FluA、B檢測(cè)陽(yáng)性率差異有顯著性意義，老年患者(≥65歲)FluA、B檢出率高。 沒(méi)有基礎(chǔ)病的患者與合并一種、二種及三種以上基礎(chǔ)病患者Flu A、B檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，顯示隨著合并基礎(chǔ)病種類增多，F(xiàn)lu A、B陽(yáng)性檢出率增高?！?各種疾病中COPD急性發(fā)作組(18.7％)及肺炎組(17.4％)Flu A抗原檢出率較其它病種高。 結(jié)論： 1 GI