p53-HDM2相互作用的非肽小分子抑制劑syl-155對腫瘤細胞的毒性作用.pdf

1、p53 是一個強力抗腫瘤活性的抑癌蛋白。在許多人類腫瘤， p53被失活，有多種機制參與失活p53。其中一個機制是癌蛋白MDM2（在人為HDM2）與之結合，并將其降解。在p53和MDM2蛋白之間形成一個負反饋調節(jié)環(huán)。5％-10％的人類腫瘤中HDM2蛋白過表達使p53失活。通過抑制腫瘤細胞中p53與MDM2的相互作用進而激活p53蛋白功能已成為尋找癌癥藥物治療的熱點。已有多個研究從不同的方面證實了這種方法的可行性，這些研究包括：顯微注射單克

2、隆抗體，反義寡核苷酸轉染，表達p53肽類似物或融合蛋白，以及微生物提取物等。然而，除反義寡核苷酸外，它們都是肽類或大分子物質，成本較高，不利于新藥開發(fā)和應用。因而，發(fā)展非肽類小分子MDM2拮抗劑就成為一個方向。 基于p53-HDM2蛋白復合物晶體結構的闡明，我們與醫(yī)科院藥物所尹大力教授合作，利用計算機輔助模型設計并用化學方法合成了一系列非肽小分子的HDM2抑制劑，我室已畢業(yè)的趙劍華博士采用ELISA方法評價了它們與MDM2的親和

3、性，其中一部分能從p53與MDM2的相互作用中釋放p53，誘導腫瘤細胞凋亡。本研究評價了趙劍華博士尚未研究的非肽類小分子的HDM2抑制劑。采用MTT法，獲得它們在5種不同腫瘤細胞的IC50，以IC50<10mg/mL作為篩查標準，最后確定syl-155進一步研究。采用MTT法、蛋白印跡和流式細胞分析檢測了syl-155對三種不同p53狀態(tài)腫瘤細胞的影響：KYSE510（人食管鱗癌細胞系）（突變型p53）、HT1080（人纖維肉瘤細胞系）