顳葉癲癇大鼠模型PSD中SNX3的表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、目的:觀察選擇連接蛋白3(Sorting nexin 3,SNX3)在顳葉癲癇(Temporal lobe epilepsy,TLE)大鼠模型突觸后致密物(Postsynaptic density,PSD)中的表達(dá)狀況,探討SNX3與TLE形成的關(guān)系。
　　方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為正常對(duì)照組(Norm組)和建模組。建立氯化鋰—匹羅卡品TLE大鼠模型,觀察30天,據(jù)有無(wú)自發(fā)癇性發(fā)作分為顳葉癲癇組(TLE組)和非顳葉癲癇組(n-TLE組)。

2、應(yīng)用蔗糖密度梯度離心法分別提取三組大鼠全腦組織的PSD蛋白。應(yīng)用Western blot檢測(cè)PSD蛋白中SNX3表達(dá)水平。應(yīng)用免疫電鏡技術(shù)檢測(cè)SNX3在大鼠大腦海馬CA1區(qū)PSD中的分布。
　　結(jié)果:1、氯化鋰—匹羅卡品大鼠TLE模型:癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)誘發(fā)成功率91.4％,TLE組32只(45.7%),n-TLE組18只(25.7%),死亡率為20%。2、PSD純度的檢驗(yàn):突觸后標(biāo)志分子N-甲基-D-天(門)冬氨酸型谷氨酸受體

3、亞基-1(NR1)和突觸后致密物-95(PSD-95)在P2成分、突觸體和PSD蛋白三組成分中均呈免疫印跡陽(yáng)性,而突觸前標(biāo)志分子突觸素(SynPhy)在PSD蛋白中呈陰性。3、PSD中SNX3表達(dá)的半定量分析:Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)SNX3在TLE、n-TLE和Norm三組大鼠大腦PSD蛋白中均呈免疫染色陽(yáng)性。TLE組大腦PSD蛋白中SNX3表達(dá)量明顯少于n-TLE組與Norm組(P<0.05)。4、CA1區(qū)PSD中SNX3的

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