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文檔簡介
1、目的:觀察熱休克蛋白27(Heat Shock Protein 27,HSP27)在顳葉癲癇大鼠模型突觸后致密物(postsynaptic density,PSD)中的表達情況,探討HSP27與顳葉癲癇形成的關系。
方法:動物隨機分為正常對照組和建模組。建立氯化鋰—匹羅卡品大鼠顳葉癲癇模型,觀察30天后,根據有無自發(fā)發(fā)作進一步分為顳葉癲癇組(TLE組)、非顳葉癲癇組(非TLE組)。應用蔗糖密度梯度離心法提取全腦組織的PSD蛋白
2、成分。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)為內參,應用免疫印跡法檢測HSP27在PSD中的表達。應用免疫電鏡觀察HSP27在海馬CA1區(qū)PSD中的表達。
結果:1、氯化鋰—匹羅卡品大鼠顳葉癲癇模型:SE誘發(fā)成功率為91.4％,TLE組32只(45.7%),n-TLE組18只(25.7%)。2、PSD純度的檢驗:突觸后標志分子N-甲基-D-天(門)冬氨酸型谷氨酸受體亞基-1(NR1)和突觸后致密物-95(PSD-95)在P2成
3、分、突觸體和PSD蛋白三組成分中均呈免疫印跡陽性,而突觸前標志分子突觸素(SynPhy)在PSD成分中呈陰性。3、PSD中HSP27表達的免疫印跡分析:在TLE組、非TLE組和正常組PSD蛋白中HSP27免疫染色均呈陽性。與正常組比較,TLE組和非TLE組PSD中HSP27的相對光密度值明顯增加(P<0.05)。與非TLE組比較,TLE組PSD中HSP27的相對光密度值亦明顯增加(P<0.05)。4、海馬CA1區(qū)PSD中HSP27表達的
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