1,25(OH)2D3抑制同種反應(yīng)性CD4+記憶性T細(xì)胞介導(dǎo)的移植排斥反應(yīng).pdf

1、目的:供者反應(yīng)性記憶性T細(xì)胞(Tm)介導(dǎo)的移植排斥反應(yīng)是目前器官移植領(lǐng)域難以攻克的主要障礙之一。CD4+Tm是Tm家族的主要成員之一,在記憶性移植排斥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。在本研究中,通過體外驗(yàn)證1,25(OH)2D3能否抑制CD4+Tm的免疫活性,結(jié)合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究1,25(OH)2D3與CD4+Tm介導(dǎo)的移植排斥反應(yīng)之間的關(guān)系,而且進(jìn)一步探討相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法:在同種異體小鼠間進(jìn)行皮膚移植,移植后4-12周內(nèi)從

2、受體鼠脾臟分離得到同種反應(yīng)性CD4+Tm,通過體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)研究1,25(OH)2D3對(duì)CD4+Tm的免疫抑制特性。然后將CD4+Tm過繼轉(zhuǎn)移至裸鼠體內(nèi),過繼轉(zhuǎn)移CD4+Tm后7天內(nèi)構(gòu)建異位血管化心臟移植模型,在該模型上應(yīng)用1,25(OH)2D3治療,摸索1,25(OH)2D3的最佳治療劑量,記錄受體鼠體重變化和移植物存活時(shí)間,針對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果從不同角度探討其發(fā)生機(jī)制。
　　 結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),1,25(OH)2D3能夠抑制CD4

3、+Tm增殖,且這種增殖抑制作用只能被外源性IL-2部分逆轉(zhuǎn)。在過繼轉(zhuǎn)移CD4+Tm的裸鼠心臟移植模型中應(yīng)用1,25(OH)2D3治療,移植物平均生存時(shí)間(MST)從6.5天延長到20.2天。與對(duì)照組相比,1,25(OH)2D3治療后受體鼠體重未見明顯下降,但血清總Ca2+水平有一定程度的升高。移植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)提示移植物中免疫損傷細(xì)胞浸潤減少,組織損傷明顯減輕。移植物中IL2、IFN-γ和Foxp3的相對(duì)基因表達(dá)量下降,而IL-10的相對(duì)