體外循環(huán)對(duì)Th1、Tc1-Th2、Tc2細(xì)胞分化影響及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的研究.pdf

1、研究表明：體外循環(huán)并發(fā)癥與免疫功能失調(diào)有關(guān)，其內(nèi)在機(jī)制目前尚不明確，缺乏有效防治手段。有效調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)功能、保持其內(nèi)部平衡，可能是體外循環(huán)并發(fā)癥預(yù)防與治療的一種思路。機(jī)體的免疫系統(tǒng)主要具有致炎反應(yīng)、抗炎反應(yīng)、細(xì)胞免疫、體液免疫四個(gè)方面的生物學(xué)效應(yīng)，這些效應(yīng)之間通過(guò)復(fù)雜的內(nèi)部聯(lián)系保持相互平衡，是機(jī)體自身穩(wěn)定的前提，而體外循環(huán)并發(fā)癥的發(fā)生與此系統(tǒng)失衡密切相關(guān)。Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞兩個(gè)重要的功能亞群，能分泌多種細(xì)

2、胞因子，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，對(duì)機(jī)體免疫防御反應(yīng)具有顯著的介導(dǎo)、調(diào)節(jié)作用，在移植免疫、抗腫瘤免疫等方面發(fā)揮重要作用。Th1、Tc1細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ、TNF-α等致炎因子，介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，在抗感染、器官移植排斥反應(yīng)和自身免疫的誘導(dǎo)過(guò)程中起重要作用；Th2、Tc2細(xì)胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-10等抗炎因子，介導(dǎo)體液免疫，在過(guò)敏反應(yīng)中起主導(dǎo)作用。鑒于Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞顯著的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，其細(xì)胞分化調(diào)控的研究已成為當(dāng)

3、前的熱點(diǎn)。目前研究認(rèn)為：在TH、TC細(xì)胞分化過(guò)程中，細(xì)胞因子是影響Th1、Tc1/Th2、Tc2極性分化的重要調(diào)節(jié)因素，但僅在分化的早期階段發(fā)揮作用。而細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet、GATA3可能是決定Th1、TC1/Th2、Tc2極性分化的決定性因素。對(duì)體外循環(huán)中Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群變化、調(diào)控分化的細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA3表達(dá)狀況進(jìn)行研究，有助于了解體外循環(huán)并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)理和探索新的防治方法。

4、 基于上述認(rèn)識(shí)，課題引入Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群做為線索，對(duì)其在體外循環(huán)中的變化及與上述免疫學(xué)效應(yīng)的關(guān)系進(jìn)行系列觀察研究。 研究?jī)?nèi)容分三部分： 1.體外循環(huán)對(duì)T淋巴細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、代謝及功能亞群分類的影響。 2.體外循環(huán)對(duì)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)免疫學(xué)效應(yīng)的影響。 3.轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet、GATA3、STAT1、STAT6在體外循環(huán)前后T淋巴細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)變化。 研究結(jié)果： 1.與

5、術(shù)前相比，實(shí)驗(yàn)組T淋巴細(xì)胞出現(xiàn)體積變大、胞漿增多、空泡等增生反應(yīng)的特點(diǎn)；細(xì)胞代謝水平升高；T淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-4mRNA、蛋白表達(dá)水平增高，IFN-γmRNA、蛋白表達(dá)水平下降。對(duì)照組無(wú)明顯改變。 2。與術(shù)前相比，體外循環(huán)引起T淋巴細(xì)胞凋亡增加，數(shù)量減少；遲發(fā)型超敏反應(yīng)發(fā)生時(shí)間推遲，強(qiáng)度抑制；殺傷腫瘤細(xì)胞能力下降；未能觀察到免疫球蛋白水平明顯變化。對(duì)照組無(wú)明顯改變。 3.與術(shù)前相比，對(duì)照組致炎介質(zhì)IL-6表達(dá)一過(guò)性上調(diào)，抗

6、炎介質(zhì)IL-10無(wú)明顯變化；實(shí)驗(yàn)組呈現(xiàn)不同特征：體外循環(huán)引起抗炎介質(zhì)IL-10升高，峰值先于致炎介質(zhì)IL-6；致炎介質(zhì)IL-6峰值仍在術(shù)后4h，術(shù)中及術(shù)后表達(dá)水平低于對(duì)照組。 4.與術(shù)前相比，實(shí)驗(yàn)組Th1.Tc1特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-betmRNA及上游轉(zhuǎn)錄因子SATA1蛋白核內(nèi)表達(dá)下調(diào)，Th2.Tc2特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GATA3mRNA及上游轉(zhuǎn)錄因子SATA6蛋白核內(nèi)表達(dá)上調(diào)；對(duì)照組無(wú)明顯改變。 研究結(jié)論： 1

7、.體外循環(huán)手術(shù)可致T淋巴細(xì)胞出現(xiàn)增生反應(yīng)，并對(duì)Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群的分化狀況產(chǎn)生影響：Th1、Tc1細(xì)胞亞群分化數(shù)量減少，Th2、Tc2細(xì)胞亞群分化數(shù)量增多。 2.體外循環(huán)手術(shù)對(duì)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫功能有抑制效應(yīng)，誘導(dǎo)機(jī)體致炎介質(zhì)IL-6、抗炎介質(zhì)IL-10表達(dá)一過(guò)性上調(diào)，抗炎介質(zhì)IL-10對(duì)致炎介質(zhì)IL-6的表達(dá)有抑制效應(yīng)：Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群的分化狀況，既能客觀反應(yīng)上述變化，又與之密切

8、相關(guān)，可能是其內(nèi)在調(diào)節(jié)機(jī)制之一。 3、與Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群變化一致，體外循環(huán)手術(shù)中T淋巴細(xì)胞內(nèi)Th1、Tc1特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet及上游轉(zhuǎn)錄因子STAT1表達(dá)下調(diào)；Th2、Tc2特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GATA3及上游轉(zhuǎn)錄因子STAT6表達(dá)上調(diào)。T-bet/GATA3可能是Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群極性分化的內(nèi)在決定性因素，有望成為調(diào)節(jié)Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞亞群平衡，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體抗炎/