PTZ點(diǎn)燃大鼠海馬FAKpY397動(dòng)態(tài)表達(dá)及其與苔蘚纖維出芽關(guān)系.pdf

1、目的：通過(guò)觀察戊四氮點(diǎn)燃大鼠模型海馬FAKpY397蛋白的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化，結(jié)合苔蘚纖維出芽的程度，探討其在苔蘚纖維出芽及癲癇致癇過(guò)程中的作用。
　　方法：將135只健康的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組90只和對(duì)照組45只。實(shí)驗(yàn)組每天腹腔注射亞驚厥劑量的PTZ(即戊四氮)—35mg/kg，對(duì)照組每天腹腔注射同等量生理鹽水，成功點(diǎn)燃后停止注射(癇性發(fā)作等級(jí)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)參照Racine標(biāo)準(zhǔn))。根據(jù)首次腹腔注射

2、后3天，1周，2周，4周和6周將實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組分別隨機(jī)分為五個(gè)亞組。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)方法及用途再將每個(gè)不同的再亞組隨機(jī)細(xì)分為三個(gè)小組:一組用于免疫熒光及免疫組化染色，檢測(cè)各不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組FAKpY397蛋白在海馬的表達(dá)分布及表達(dá)量的變化;一組用于Western Blot，檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)不同組別大鼠海馬區(qū)FAKpY397蛋白總表達(dá)量及其變化趨勢(shì);另一組用于Timm染色，檢測(cè)海馬苔蘚纖維出芽情況并進(jìn)行評(píng)分。其中實(shí)驗(yàn)組每小組各6只，對(duì)

3、照組每小組各3只。
　　結(jié)果：
　　1.動(dòng)物行為學(xué)
　　隨著每天相同亞驚厥劑量PTZ經(jīng)腹腔注射給藥，實(shí)驗(yàn)組大鼠所表現(xiàn)的癇性發(fā)作反應(yīng)逐漸加重，多數(shù)給藥后第21-28天（23.1±2.3天）被成功點(diǎn)燃。PTZ致癇模型點(diǎn)燃率為93.75％，而死亡率為4.44％。被成功點(diǎn)燃的大鼠可見(jiàn)RacineⅠ至RacineⅢ級(jí)的自發(fā)癇性發(fā)作。對(duì)照組大鼠未出現(xiàn)癇性發(fā)作，行為正常。
　　2.Western Blot結(jié)果顯示:在PTZ點(diǎn)燃

4、致癇過(guò)程中，海馬FAKpY397蛋白總表達(dá)量于再PTZ腹腔注射后3d稍下降，1周時(shí)開(kāi)始增加，4周達(dá)高峰，6周下降，仍高于對(duì)照組。除3天組外（P＞0.05），實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　3.免疫熒光及組化結(jié)果顯示:FAKpY397在海馬各區(qū)有表達(dá)，主要分布于胞漿;免疫組化半定量分析示CA3區(qū)FAKpY397蛋白表達(dá)于PTZ腹腔注射后3d開(kāi)始增加，4周達(dá)高峰，6周下降，仍高于對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組中除1周

5、組與2周組進(jìn)行比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），其余各時(shí)間點(diǎn)兩兩比較及實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　4.苔蘚纖維出芽評(píng)分
　　對(duì)照組CA3區(qū)未見(jiàn)苔蘚纖維出芽或僅見(jiàn)輕微出芽，苔蘚纖維出芽評(píng)分在各時(shí)間點(diǎn)間兩兩比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)組CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分從PTZ腹腔注射后3天開(kāi)始增加，4周時(shí)達(dá)高峰，6周下降。實(shí)驗(yàn)組中除4周與6周間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），其余各時(shí)間點(diǎn)兩兩比較及實(shí)驗(yàn)