點陣C02激光治療兔耳增生性瘢痕后成纖維細胞凋亡及VEGF變化規(guī)律的研究.pdf

1、目的：⑴通過點陣CO2激光對兔耳增生性瘢痕治療的實驗研究，驗證點陣CO2激光治療增生性瘢痕的有效性；⑵觀察點陣CO2激光治療兔耳增生性瘢痕后各時期瘢痕中成纖維細胞凋亡及VEGF表達情況的變化，為治療的有效性提供理論依據(jù)。
　　方法：①新西蘭大白兔20只制作兔耳增生性瘢痕的動物模型。兔雙耳腹側(cè)局麻下每側(cè)作5個直徑為1cm的正方形切口，切口間距1cm，完整切除皮膚全層及軟骨膜，保留軟骨。創(chuàng)面予暴露、每日絡(luò)合碘換藥一次。三周內(nèi)創(chuàng)面上皮化

2、形成增生性瘢痕。②隨機將一側(cè)耳設(shè)定為點陣CO2激光治療組，對側(cè)設(shè)定為空白對照組。造模后三周治療組行點陣 CO2激光治療（DeepFX，能量20.0mJ頻率300Hz，Shape:2,Size:10,Pulses:2,Density:5％），對照組無任何干預(yù)。治療后創(chuàng)面不予特殊處理。③對照組、治療組切取治療后1小時、治療后3天、7天、14天、28天瘢痕組織，行HE染色觀察各組各時期鏡下成纖維細胞形態(tài)、密度，毛細血管增生情況及膠原纖維排列，

3、TUNEL法檢測成纖維細胞凋亡率變化，免疫組化檢測VEGF的表達變化。
　　結(jié)果：⑴大體觀察：點陣CO2激光治療組較對照組瘢痕自治療后一周時間左右色澤變淡，突出皮面的增生塊軟化、變平,點陣CO2激光治療組瘢痕軟化、完全平坦所需時間是50.90±2.28天，對照組所需時間是69.00±2.10天。⑵HE染色組織學(xué)觀察：增生性瘢痕鏡下顯示瘢痕最厚部位為周邊正常皮膚厚度的3-4倍，主要是大量的成纖維細胞及不規(guī)則排列的膠原，其間見毛細血管

4、及炎性細胞，結(jié)構(gòu)近似人類的增生性瘢痕。從治療后14天開始，經(jīng)點陣CO2激光治療的瘢痕組織較同期對照組瘢痕中成纖維細胞明顯減少，膠原排列有序，毛細血管數(shù)量減少。⑶TUNEL檢測成纖維細胞凋亡：對照組在瘢痕形成的早期，僅有少量凋亡細胞，隨時間推移凋亡細胞逐漸增加；治療組治療后即刻即可在柱狀損傷帶周圍觀察到成纖維細胞凋亡增多現(xiàn)象，治療組治療后1小時、治療后3天、7天、14天、28天成纖維細胞凋亡率逐漸增高，各時期凋亡率均比同期對照組高（P＜0

5、.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。⑷血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達的變化：點陣 CO2激光治療后7天、14天、28天瘢痕中的VEGF陽性顆粒表達水平逐漸降低，與同期對照組比較明顯降低（P＜0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而對照組VEGF陽性顆粒表達水平在上皮化后28天時才開始顯著降低。
　　結(jié)論：①點陣CO2激光治療可以促進兔耳增生性瘢痕軟化、變平。②點陣CO2激光治療兔耳增生性瘢痕后使瘢痕組織中成纖維細胞凋亡增加、VEGF的表達降低。